當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>RNA/DNA提取>>蛋白質研究產品>> 蛋白膠中量回收試劑盒5次操作步驟
蛋白膠中量回收試劑盒5次操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
蛋白膠中量回收試劑盒5次操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
蛋白膠中量回收試劑盒5次操作步驟詳細說明書:
蛋白膠中量回收試劑盒5次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
6-甲基25克
(3-7萬)(多聚-L-賴酸)
洋橄欖油,英文名或英文縮寫:Olive oil,級別:BR,97%,規格:5克
6-鱗醋-葡萄糖醋-三內鹽(-20℃) 6-PHOSPHOGLUCONIC cCID TRIwo7ium ScLT 23411-70-4
N-乙酰本,英文名或英文縮寫:Acetanilide,級別:CP,規格:5克
鐵,英文名或英文縮寫:Iron powder,級別:AR,99%,規格:25克
4245-35-6丙烯酸異戊酯(含*作為穩定劑)ACRYLIC ACID ISOAMYL ESTER
1-Chloro-5-metxoxy-3,4-dixy7no-nepxtxelene-2-carbaldehyde 187963-07-1
2,5-二甲基 2,5-Dithiol,≥98.0 % 4001-61-0 5G 多肽試劑
D-*25PK
AEBSFAEBSF超純級白色至米白色結晶COLDsigma
58-55-9*;;;3,7-二氫-1,3-二甲基-1H-嘌呤-2,6-二酮;2,6-二羥基-1,3-二甲基嘌呤Theophylline;1,3-Dimetxyl xanthine;1,3-Dimetxyl-2,6-dihyroxypurine
Trypanblue臺盼藍5克超純,99%
3-基-1-本基-2-鱗 1-氧化物 3-Mqthyl-1-phq3-Mqthyl-1-phqnyl-2-phospholqnq 1-oxidq, 94%
NRP2 Others Human 人 Neuropilin 2 / NRP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;C918
CM-R058大鼠膀胱上皮細胞*培養基100mL
MCG803細胞,人胃腺癌細胞 人腦膠質瘤細胞系,U373細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO-76
COLO 205(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CD14 Others Mouse 小鼠 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;C918
NRP2 Others Human 人 Neuropilin 2 / NRP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-R058大鼠膀胱上皮細胞*培養基100mL
MCG803細胞,人胃腺癌細胞 人腦膠質瘤細胞系,U373細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO-76
COLO 205(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CD14 Others Mouse 小鼠 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照)
蛋白膠中量回收試劑盒5次操作步驟人胚肺成纖維細胞;IMR-90 人淋巴血管內皮細胞*培養基 100mL
人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照)
mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞
人間充質干細胞-脂肪
NCI-H661 人大細胞肺癌細胞
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。