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動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 08:44:21瀏覽次數:143次

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動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟詳細說明書:

動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
麗春紅2R10028°C

POPSO 10g/100g原裝 Sigma P3405

對本基酚,英文名或英文縮寫:4-xy7noxybipxenyl,級別:CP,95%,規格:500

二醋6-羧基熒光速(-20) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6

6,6-二甲基-2-亞甲基-二環[3.1.1]-庚烷,英文名或英文縮寫:β-Pinen,級別:BR,規格:25
銻酸鈉128

(蝸牛酶)

甜菊糖shēng huà shì jì容量:25

叔丁基 4-TqRT-BUTYLPYRIDINq 3978-81-

四氧嘧啶shēng huà shì jì容量:5
AGAROSE,HIGHEEO高電滲瓊脂糖生物技術級100G

鉻姆沙伯 W AWChroMosorb W AW;

Creatinephosphatewo7iumsalt無水嶙酸肌酸鈉鹽500毫克AR,98.5%

苯并噻唑-2- 2-Benzothiazoleitrile,98% 56278-50-3 1G 通用試劑

卵清蛋白 (FITC標記) Ovalbumin-FITC Labeled antibody Null 1ML FITC熒光抗體
TYRP1 Others Human TRP1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人癌細胞;MDA-MB-157

CM-H134人角膜內皮細胞*培養基100mL

CNE1, 人鼻咽癌細胞系 草魚吻端細胞,ZC-7901細胞 SW480 [SW-480](人結腸癌細胞)

小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)

EFNA1 Others Human EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人癌細胞;MDA-MB-157

PGA4 Others Human PGA4 / Pepsinogen A 人細胞裂解液 (陽性對照)

DU 145 人前列腺癌細胞

SW480 [SW-480]人結腸腺癌細胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS

CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

人羊膜上皮細胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細胞 Mouse
動物上皮細胞生長因子5mL操作步驟人胚肺成纖維細胞;HFL-I 人臍帶單核細胞*培養基 100mL

EB病毒轉化的人B淋巴細胞(彝族);HYL

MYOC Others Human MYOC / Myocilin 人細胞裂解液 (陽性對照)

MG-63, 人骨肉瘤細胞

SERPINF1 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinF1 / PEDF 蛋白 (His 標簽)

NAMALWA Burkitt`s淋巴瘤細胞

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