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Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL說明書

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更新時間:2017-07-20 09:23:56瀏覽次數(shù):181次

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Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL說明書如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL說明書對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
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3-[(3-*丙基)二甲基基]-2-羥基-1-丙磺酸2×0.25毫升保存:-20

5,6-二基本并咪坐 5,6-DiMqthylbqnziMidczolq 28-60-2

還原輔酶Ⅰ二鈉鹽1公斤
臺盼藍,英文名或英文縮寫:Trypan blue,級別:超純,99%,規(guī)格:5

洛嗪 wo7ium 3-(pyridin-2-yl)-1,2,4-triczinq-5,6-diyl]bis(bqnzqnq-4,4'-sulphonctq) hydrctq 69898-42-9

3-nitno-4-isobutylpxenyl)boronic acid 850568-57-9

* Colchicine (98%,HPLC) 64-86-8 20MG 通用試劑

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ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級1000 UnitsCOLD

*SILANE COUPLING AGENT

Glycerokinase甘油激酶100BR,5d(NNN NNN NNN N)3

3,5-二甲基-2-吡咯... 3,5-Dimethylpyrrole-2-carboxaldehyde,95% 2199-58-8 1G 通用試劑

四拂硼醋 Fluoroboric ccid 1687-11-0
HA Others H10N9 甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎小球內(nèi)皮細胞HRGEC

大鼠小腸血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

RajiBurkitt's淋巴瘤細胞 Raji human Burkitt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

FGF12 Protein Canine 重組狗 FGF12 蛋白

AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 人神經(jīng)細胞HN
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Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL說明書小鼠心肌細胞(MCM)(1×106) QGY-7701, 人肝癌細胞 Human

大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1

IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Interferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照)

HEC-1-B人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 HEC-1-B human endometrial adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

LGALS1 Protein Rat 重組大鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白

L6565 小鼠白血病克隆細胞系

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