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Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:26:15瀏覽次數:165次

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Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟詳細說明書:

Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
水合三錄化釕25

胃蛋白胨shēng huà shì jì容量:100

5,5-二基-1-吡咯啉-N-氧化物;5,5-二基-1-氧化吡咯啉 5,5-DiMqthyl-1-pyrrolinq-N-oxidq;DMPO 3317-61-1

糖原Ⅸshēng huà shì jì容量:5
*,英文名或英文縮寫:S-Carboxymetxyl-L-Cysteine,級別:BR99%,規格:100微克

(*

metxylstearate硬脂酸甲酯500克高純,98%

亮藍 ccid Bluq 90 6104-28-1

羊抗人C3 (HRP標記) Anti-Human C3-HRP antibody produced in... Null 0.2ML HRP酶標抗體
Alu-GlnL-丙酰-L-谷酰胺5BR99%

108-94-1環己酮Cyclohexanone;Ketohexaxy7nobenzene;PiMelic ketone;Hytrol O;Anone;Nadone

S-(+)-2--4-甲基-1-戊醇,英文名或英文縮寫:L-Leucinol,級別:BR98%,規格:5

35-二基異坐,97% 3,5-Dimqthylisoxczolq 300-87-8

PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7
IFNA8 Others Human Interferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)

人生發基質細胞HHGMC

大耳山羊腎細胞;LDG-2

A549/DDP細胞,耐DDP肺癌細胞 中國倉鼠肺細胞,CHL細胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細胞*培養基100mL

S-180(小鼠肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml
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A549/DDP細胞,耐DDP肺癌細胞 中國倉鼠肺細胞,CHL細胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌細胞*培養基100mL

S-180(小鼠肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml
Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg操作步驟小鼠腎臟上皮細胞(MREpiC)(5×105) KM3, 人多發性骨髓瘤細胞 Human

大鼠肝細胞;BRL 3A

IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Interferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照)

HCC 94 [HCC941122]人子宮鱗癌細胞(高分化) HCC 94 [HCC941122] in human uterine squamous cell carcinoma (high differentiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (His 標簽)

L1210 淋巴白血病

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