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Indo-1 AM1mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:28:56瀏覽次數:184次

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Indo-1 AM1mg操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Indo-1 AM1mg操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Indo-1 AM1mg操作步驟詳細說明書:

Indo-1 AM1mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Indo-1 AM1mg操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
2,4-二甲氧基100

(Bind--Silane親和硅烷)

脫羧酶對照試驗培養基shēng huà shì jì容量:RT10

4-烯基,96% 4-Vinylpyridinq 100-43-6

羧肽酶A(牛胰)shēng huà shì jì容量:100
羧甲基纖維素CM-32shēng huà shì jì容量:100毫克

2783-17-71,12-二基十二烷 98%1,12-Dodecanediamine

水合5-甲基間本二酚,英文名或英文縮寫:3,5-Dixy7noxytolue,級別:測熱量試劑,規格:5

化亞鐵,四水 Iron(II) chloride tetrahydrate 13478-10-9 25G 通用試劑

細胞松弛素 B Cytochalasin B from Drechslera dematio... 14930-96-2 1M
Aluminon鋁試劑100毫克高純

鋅試劑;[2-(2-羌基-5-磺基本偶氮)亞芐基]基本加醋;5-(2-羧基本基)-1-(2-羌基-5-磺基本基)-3-本基NFDB9;2-羧基-2-羌基-5-磺基本鐕基本 Zincon;2-Ccrboxy-2-xy7noxy-5-sulfoforMczylbqnzqnq;1-(2-xy7noxy-5-sulfophqnyl)-3-phqnyl-5-(2-ccrboxyphqnyl)forMczcn;5-(o-Ccrboxyphqnyl)-1-(2-x
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照)

人食道平滑肌細胞cDNAHESMC cDNA

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2 *-EDTA(100mL酶解緩沖液) 10mL

MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human

PLA2G2A Others Human PLA2G2A / PLA2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
人食道平滑肌細胞cDNAHESMC cDNA

COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2 *-EDTA(100mL酶解緩沖液) 10mL

MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞 Human

PLA2G2A Others Human PLA2G2A / PLA2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
Indo-1 AM1mg操作步驟小小神經膠質細胞(MM)(5×105) RBE, 人肝膽管癌細胞 Human

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照)

RL95-2人子宮內膜癌細胞 Human endometrial carcinoma cells RL95-2 D-MEM/F-12培養基+10%FBS

HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)

KYSE450 食管癌

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