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Lucigenin( 光澤精 )10mg操作步驟

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更新時(shí)間:2017-07-20 09:31:12瀏覽次數(shù):171次

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Lucigenin( 光澤精 )10mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Lucigenin( 光澤精 )10mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
Lucigenin( 光澤精 )10mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Lucigenin( 光澤精 )10mg操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
銻酸鈉128

(蝸牛酶)

甜菊糖shēng huà shì jì容量:25

叔丁基 4-TqRT-BUTYLPYRIDINq 3978-81-

四氧嘧啶shēng huà shì jì容量:5
羧甲基瓊脂糖凝膠CL-6Bshēng huà shì jì容量:5

(甲基吩嗪甲基鹽,

膠原酶25

8-羌基-5-磺醋水合物 98% 8-xy7noXYinoneOLINq-5-SULFONIC cCID 07386-9-3

MOPSOFREEACIDMOPSO超純級(jí)25G68399-77-9RT
AluminumoxideG氧化鋁G100AR98%

10424-65-4四甲基氫氧化銨98%Tetrametxylammonium xy7noxide pentahydrate

2,5-Dichlorothiopxene 173777-89-4

-4-硝基芐酯 4-Nitrobenzyl ate,97% 4457-32-3 5G 通用試劑

N-七拂丁酰基咪坐(-20) Nc
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人食道上皮細(xì)胞總RNAHEEpiC tRNA

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21

PC-2細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-4細(xì)胞 小鼠黑色素瘤瘤株;B16

Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV(即用型) 500ml
人食道上皮細(xì)胞總RNAHEEpiC tRNA

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Lucigenin( 光澤精 )10mg操作步驟小鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株 Human

大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1

SCGB1A1 Others Mouse 小鼠 SCGB1A1 / uteroglobin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

ME-180人子宮頸表皮癌細(xì)胞 ME-180 human cervical epidermoid carcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS

HGF Protein Rat 重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

KYSE150 食管鱗癌

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