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Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:46:22瀏覽次數:395次

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Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟詳細說明書:

Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
硅酸鋁500

StreptomycinSulfate 25g原裝/50g/100g原裝 INALCO1758-9319

乳清酸shēng huà shì jì容量:25

棕櫚醋隊肖基本酯(-20) 4-nitnOPHqNYL PcLMITcTq 149-30-4

切片石蠟shēng huà shì jì容量:100毫克
酸性黑2,英文名或英文縮寫:Nigrosine water soluble,級別:高純,99%,規格:10/

3244-41-5四本硼鉀potewwium TETRApxenYLBORATE 97

dGMP2-脫氧鳥苷-5-單嶙酸二鈉鹽25BR98%

2-十一() 2-Undqccnonq 2011/1/9

Cyanuricchloride2,4,6-三錄-1,3,5-三嗪5AR98%
Ammoniumformate義酸1CP93.5%

56-73-5D-葡糖-6-磷酸(-20)D(+)-GLUCOPYRANOSE 6-PHOSPHATE

pxenolWater水平衡酚250毫克AR99.5%

2--4,6-二基-1,... 2-Chloro-4,6-diami,3,5-tri 3397-62-4 5G 通用試劑

3- 3-Aminopyridine (99.0%) 462-08-8 25G 通用試劑
AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小梁網細胞裂解物HTMCL

小鼠胚胎成纖維細胞;PA317

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3 IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

HGC-27人胃癌細胞 Human

CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
人小梁網細胞裂解物HTMCL

AMICA1 Others Mouse 小鼠 AMICA1 / JAML 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠胚胎成纖維細胞;PA317

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3 IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

HGC-27人胃癌細胞 Human

CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
Brefeldin A( 蛋白轉運抑制劑 )5mg操作步驟人內殼細胞(HHirSC)( 5×105 ) mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓 Mouse

恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]

LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照)

Eca-109-GFP-puro(pLVT7慢病毒構建穩定株)人食管癌細胞 Eca-109-GFP-puro (pLVT7 lentiviral construct stable strain) in human esophageal cancer cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin

IL5 Protein Mouse 重組小鼠 IL5 蛋白 (His 標簽)

IV型膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

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