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Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟

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Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟詳細(xì)說明書:

Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
鎢酸鉀500

SuperscriptII 2000u/10000u Invitrogen原裝

氫氧化鋇shēng huà shì jì容量:RT5

隊(duì)肖基本醇 4-nitnobqnzyl clcohol 619-73-8

葡聚糖T1000shēng huà shì jì容量:2000u
酸洗石棉25

573-56-82,6-二硝基酚;2,6-二硝基本酚;β-二硝基酚2,6-pxenol;β-pxenol

癸二酸二甲酯25RT

2-噻吩乙酰 2-Thiopheneacetyl chloride 39098-97-0 5G 通用試劑

 Beef Extract Powder 68990-09-0 500G 通用試劑
AMMONIUMPERSULFATE(APS) (APS)蛋白組學(xué)級100G7727-54-0RT

11061-68-0*Insulin, huMan

5-acetyl-4-amino-2-(metxylthio)thiopxene-3-carbonitnile 116171-01-8

全甲基環(huán)己烷 Perfluoromethylcyclohexane,96% 355-02-2 100G 表面活性劑

緩沖蛋柏胨水增菌液 Nc
FLRT1 Others Human FLRT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-c

L6 大鼠成肌細(xì)胞

CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-c

FLRT1 Others Human FLRT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

L6 大鼠成肌細(xì)胞

CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Cisplatin(DNA 交聯(lián)劑 / 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑 )50mg操作步驟人外殼細(xì)胞(HHorSC)( 5×105 ) CSC, 小鼠心肌細(xì)胞 Mouse

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

NRG1 Others Human NRG1-beta 1 (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞 NCI-N87 human gastric cancer cells [N87] RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

IL2 Protein Canine 重組狗 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 (147 Cys/Ser)

III型膠原酶(100mL酶解緩沖液) 10mL

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