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TLR4 激活劑2mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:27:29瀏覽次數:192次

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TLR4 激活劑2mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

TLR4 激活劑2mL操作步驟詳細說明書:

TLR4 激活劑2mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
TLR4 激活劑2mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
TLR4 激活劑2mL操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
葡萄球菌增菌肉湯100毫克28

(曲拉通X-114)

酵母粉瓊脂shēng huà shì jì容量:1

4-羌基間本二加醋 4-xy7noxyisophthclic ccid 636-46-4

肌激酶shēng huà shì jì容量:5
四氫錄精,英文名或英文縮寫:Spermine tetraxy7nochloride,級別:BR98%,規格:500

97-94-9三乙基Trietxylborane

EZ-VISION100BPDNALADDEREZ-Vision 100BP DNA Ladder生物技術級粉色至紅色液體FRZsigma

環丙甲醛 Cyclopropanecarboxaldehyde,98% 1489-69-6 1G 通用試劑

鄰聯胺/基二甲基聯苯/3,3-二甲基聯苯胺/鄰甲聯苯胺/4,4-二基-3,3-二甲基聯
APT瓊脂shēng huà shì jì容量:500毫升

磺安本吡坐 SULFcPHqNcZOLq 1926/8/9

2,4-Difluoro-5-nitnopxenylboronic acid 325786-11-6

D-201型大孔吸附樹脂 D-201 Macroporous Resin Null 250G 吸附樹脂

L-天冬酸-β-甲酯鹽酸鹽/β-甲酯-L-天冬酸鹽酸鹽/L-天門冬酸-β-甲酯鹽酸鹽/L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride BR9
ERBB2 Others Mouse 小鼠 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胰腺導管癌細胞;CFPAC-1

CoC1(懸浮) 卵巢癌

MRC-5-EGFP+puro人胚肺成纖維細胞 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts MEM+10%Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycin

TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標簽)

人角膜上皮細胞 (HcorF)( 5×105 ) 293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系 Human
人胰腺導管癌細胞;CFPAC-1

BMPR1B Others Human BMPR1B / ALK-6 (149-502) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R070大鼠尿道上皮細胞*培養基100mL

ACHN, 人腎細胞腺癌細胞 胚肺細胞,HLF細胞 Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌細胞)

小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2

RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人細胞裂解液 (陽性對照)
TLR4 激活劑2mL操作步驟人癌細胞;MDA-MB-157 大鼠小腸血管內皮細胞*培養基 100mL

虹膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

FCGR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照)

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

lovo, 人結腸癌細胞

HBMEC 人腦微血管內皮細胞

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