小鼠滑膜細胞公司正在出售的產品：113558-15-9羊藿次II;Icarisid II 規格： 20mg
22255-40-9馬錢 規格： HPLC≥98%;20mg
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58543-16-1瑞鮑迪甙 A 規格： HPLC≥98%，20mg/vial
林 規格： 100mg
474-07-7蘇木 規格：
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產品名稱 | 小鼠滑膜細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
分類 | 原代細胞 |
貨號 | GOY-01X0974 |
商品介紹：
名稱 小鼠滑膜細胞 2.組織來源：滑膜組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠滑膜細胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構，各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎（OA）以關節軟骨退行性變為特征，其病理改變累及關節的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的最大細胞群體，是維持關節正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。滑膜細胞主要功能：①滑膜細胞產生潤滑液成分，并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞；③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。 5.方法簡介： ()實驗室分離的小鼠滑膜細胞采用混合酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的小鼠滑膜細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M083 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳2-3代左右 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
1瓶 Ana-1細胞株 Ana-1 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL 人前列腺素E合成3(Prostaglandin E synthase 3)ELISA試劑盒
10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯培養基顆粒 10% Trypticase Soy Broth 225ml/袋*10 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Ceruloplasmin
50次 DOP-PCR試劑盒 DOP-PCR Kit -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for H
小鼠滑膜細胞250U 核糖核酸HII RNase HII -20℃保存
2 ug pLNCX pLNCX 低溫運輸，-20℃保存
30次 一站式DNA非變性PAGE電泳套裝 One-Stop DNA Native PAGE Pack 常溫
1瓶 AE-2細胞株 AE-2 低溫運輸和保存
2 ug RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen 低溫運輸，-20℃保存
游離測定培養基 Free Biotin Assay Medium 250g
200mg L-NAME（eNOS抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
Goat Anti-rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗兔IgG 規格: 0.1ml
0.1mL×10 XL1-Blue化學感受態細胞 XL1-Blue Competent Cell -80℃保存
Fibrillarin 核仁纖維蛋白抗體 規格: 0.2mlRAB-14 RAS相關蛋白基因Rab14抗體 0.2ml
phospho-CSF1R (Tyr723) 磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 規格: 0.1ml
LIS1 無腦回的致基因LIS1抗體 規格: 0.2ml
