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| 產品名稱 | F-DH5α 感受態細胞 100ul*20 |
| 包裝 | 100ul*20 |
| 分類 | 克隆感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 5克
shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 25克
shēng huà shì jì 鹽酸萘乙二胺 容量： 5克
shēng huà shì jì * 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽酸肼 容量： 25克
shēng huà shì jì 鹽酸* 容量： 25克
shēng huà shì jì 鹽酸環胞苷 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽酸胍 容量： 1克
shēng huà shì jì 鹽酸二苯肼 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽酸吡哆醛 容量： 2KU
shēng huà shì jì * 容量： 500U
shēng huà shì jì 鹽酸-S-芐基異硫脲 容量： 500克
shēng huà shì jì 鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽酸 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 鹽肉湯 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽培養基 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽還原試劑（甲、乙液） 容量： 1米
shēng huà shì jì 鹽胨水培養基 容量： 100克
shēng huà shì jì 鹽蛋白胨水培養基 容量： 1米
shēng huà shì jì 巖藻多糖 容量： 2～8℃
CD6 犬白細胞分化抗原6 規格： 48T/96T
IL-6 犬白介素6 規格： 48T/96T
IL-4 犬白介素4 規格： 48T/96T
IL-2 犬白介素2 規格： 48T/96T
IL-18 犬白介素18 規格： 48T/96T
IFN-γ 犬γ干擾素 規格： 48T/96T
GABA 犬γ氨基丁酸 規格： 48T/96T
F-DH5α 感受態細胞 100ul*20β-EP 犬β內啡肽 規格： 48T/96T
IFN-α 犬α干擾素 規格： 48T/96T
5-HT 犬5羥色胺 規格： 48T/96T
2,3-DPG 犬2,3-二磷酸甘油酸 規格： 48T/96T
AE 禽腦脊髓炎 規格： 48T/96T
MHC/BoLA 牛主要組織相容性復合體 規格： 48T/96T
PROG 牛孕激素/孕酮 規格： 48T/96T
ACAC 牛乙酰乙酸檢測 規格： 48T/96T
IGF-1 牛胰島素樣生長因子1 規格： 48T/96T
PAF 牛血小板活化因子 規格： 48T/96T
SAA 牛血清淀粉樣蛋白A 規格： 48T/96T
Zn-MT 牛鋅金屬硫蛋白 規格： 48T/96T
CP 牛銅藍蛋白 規格： 48T/96T
5克
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
