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人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片

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人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片 產品詳情

人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCCECACCDSMZJCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱  人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片
形態特性   上皮細胞
生長特性  貼壁生長
特征特性   人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達載體pCMV.3中,轉染結腸癌細胞RKO,建立了RKO-AS45-1細胞株。 該細胞含有穩定整合巨細胞病毒(CMV)啟動子的表達載體。 RKO-AS45-1細胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45DNA修復、凋亡和藥物敏感性研究。
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:23天內可長滿。 
傳代情況  PN5
凍存條件   *培養基+8%DMSO
支原體檢測  陰性 
STR   
同工酶

染色體

使用權限 A
人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)90%;優質胎牛血清,10%
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
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MFCAgar
人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片培養溫馨提示:
1)公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件,中心不保證其準確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規,充分考慮可能存在的風險和責任,采取適當的安全和處理措施盡量降低對健康或環境的危害。

 

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