特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
MS2過程控制試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10773 |
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
變幻青霉培養基: 14模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 25 定期移植法
西地西菌近海細菌模式菌株: no土壤/森林樹下土提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 471生長條件: 25℃
冠突曲霉生長條件: 25-28℃培養基: 0016提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
巴斯德畢赤酵母培養基: 0013表達、分泌磷脂酶提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
玫瑰擬層孔菌生長條件: 25培養基: 14子實體提供形式: 斜面培養物模式菌株: no 定期移植法
單核增生李斯特菌研究 教學用于病原菌目的基因檢測模式菌株: no病死豬腦提供形式: 凍干物安全等級: 2培養基: 396生長條件: 37
-1607℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
小單孢菌培養基: 0039模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
病研所芽孢桿菌培養基: 831模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
小單孢菌屬抗瘧疾模式菌株: no塘土提供形式: 斜面培養物安全等級: 1培養基: CM0012生長條件: 35-37C
褐口蘑培養基: 17模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養物安全等級: 1生長條件: 28 定期移植法
ATCC19255=CGMCC1.2141=DSM20484=NRRLB-3469模式菌株模式菌株: yes種屬: Leuconostoc│mesenteroides subsp. dextranicum提供形式: 凍干物安全等級: 1培養基: 0006生長條件: 30℃
多粘類芽孢桿菌培養基: CM0002多粘菌素E。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
-1608℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
角磷白鵝膏生長條件: 25-28℃培養基: 14提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結法;礦物油法;定期移植法
運動節桿菌培養基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
環孢菌素,環孢素A,環孢霉素AParvalbumin 微白蛋白/細小清蛋白抗原Tenascin C (C terminal) 粘合素抗體(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗體
環孢菌素,環孢素A,環孢霉素A(標準品)Peptide YY 酪酪肽多肽(1-36)TEM7R/Plxdc2 腫瘤血管內皮標記相關蛋白質7抗體
鹽噻匹定Rad51 Rad51抗原TEM1/CD248 內涎蛋白/內皮唾液蛋白抗體
鹽噻匹定(標準品)RAP1A (RAS-related protein-1a precursor) Rap1A抗原omerase Binding Protein, P23 端粒酶結合蛋白P23抗體
阿糖胞苷(進分)RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維甲受體-β抗原TEF4/TEA domain family member 2 轉錄增強因子TEF4抗體
阿糖胞苷RASSF1A(Ras association domain family 1A) Ras相關區域家族1A抗原TEF3/TEAD4 轉錄增強因子TEF3抗體
阿糖胞苷(標準品)Resistin 抵抗素抗原TECTB 遺傳性耳聾β-tectorin抗體
達卡巴RGS2 peptide G蛋白信號轉導調節因子2抗原TdT/DNTT 末端脫氧核苷轉移酶抗體
達卡巴(標準品)RhoA (RhoA protein) RhoA抗原TDRD9/HIG1 缺氧誘導蛋白HIG1抗體
達沙替尼(無水)Rho C(Ras homolog gene family member C) RhoC抗原TDP-43 Tar DNA 結合蛋白43抗體
MS2過程控制試劑盒Phentolaminemesilate 甲磺酚妥拉明 質量規格:>98%,BR
Phentolaminemesilate 甲磺酚妥拉明(標準品) 質量規格:>98%,BR
Vemurafenib,PLX4032 維羅非尼,RG7204 質量規格:>98%,BR
PraeruptorinE 白花前胡素E 質量規格:>98%,BR
PraeruptorinA 白花前胡甲素(標準品) 質量規格:>98%,BR
trans-Zeatin 反式玉米素 質量規格:>98%,BR
Dipotassiumtetrachloroplatinate 亞鉑鉀 質量規格:>98%,BR
Cycloastragenol 環黃芪醇 質量規格:>98%,BR
AristolochicacidA 馬兜鈴A 質量規格:>98%,BR
Purpurin 羥基茜草素/紅紫素(標準品) 質量規格:>98%,BR
JujubosideD 棗仁皂苷D(標準品) 質量規格:>98%,BR
Pseduoprotodioscin 偽原薯蕷皂苷 質量規格:>98%,BR
Oxypaeoniflorin 氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標準品) 質量規格:>98%,BR
3-isomangostin 3-異倒捻子素 質量規格:>98%,BR
Naringindihydrochalcone 柚皮苷二氫查爾 質量規格:>98%,BR