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elisa分析檢測試劑盒檢測步驟說明書2017/08/07
elisa分析檢測試劑盒注意事項⒈正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。⒉在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其
elisa分析檢測試劑盒處理方式2017/08/04
elisa分析檢測試劑盒處理方式1、ELISA采集血漿時一般不加抗凝劑(主要為枸櫞酸鹽和檸檬酸鹽),采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存備用;1.1、血液包括血漿和血清,它們的主要區別就是:血清凝血而血漿不凝血,所以它們的處理方式也就不一樣1.2、如要采集血清,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存備用;2、胃液和唾液的采集方式一般現采現用,但是一般飯后半小時內不易采
elisa分析檢測試劑盒雙抗體夾心法操作步驟2017/08/02
elisa分析檢測試劑盒雙抗體夾心法操作步驟:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃**。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1
elisa分析檢測試劑盒標本要求2017/07/31
elisa分析檢測試劑盒標本要求1、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。該elisa試劑盒適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本,靈敏度*。操作說明大鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)elisa測定試劑盒使用說明書標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實
elisa分析檢測試劑盒檢驗方法2017/07/28
elisa分析檢測試劑盒檢驗方法1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。4.混勻,置37℃反應30分鐘。5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。7.洗滌,同步驟5。8.每孔依次加
elisa分析檢測試劑盒酶和酶作用的底物2017/07/26
elisa分析檢測試劑盒酶和酶作用的底物1.辣根過氧化酶(HRP):HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,純化方法也不復雜。它是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為44kD;是一種復合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結合而成的一種卟啉蛋白質。主酶為無色糖蛋白,在275nm波長處有zui高吸收峰;輔基是深棕色的含鐵卟啉環,在403nm波長處有zui高吸收峰。HRP對受氫體的專一性很高,除H202外,僅作用于小分子醇的過氧化物和尿素的過氧化物。后者為固體,作為試劑較H202方便。許多化合物可作為H
elisa分析檢測試劑盒檢測程序2017/07/24
elisa分析檢測試劑盒注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.IL-10elisa試劑盒宜置4oC冰箱保存。本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:
elisa分析檢測試劑盒操作步驟說明書2017/07/21
elisa分析檢測試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白
elisa定量試劑盒操作注意事項2017/07/19
elisa定量試劑盒操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發,避免長時間
elisa分析檢測試劑盒標本的采集及保存2017/07/14
elisa分析檢測試劑盒標本的采集及保存:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液
elisa分析檢測試劑盒實驗方法與步驟2017/07/10
elisa分析檢測試劑盒實驗方法與步驟(1)環磷酰胺處理:取骨髓前24h先給小鼠腹腔注入環磷酰胺,注射劑量為100mg/kg動物體重。(2)取骨髓:用損傷脊髓法處死小鼠,然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉,取出大腿骨,用一小塊紗布來回搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關節頭,然后用注射器吸取5ml生理鹽水,插入股骨一端,將骨髓細胞沖洗至10ml的離心管中。可重復沖洗多次,直至骨髓腔呈白色為止。(3)離心處理:將所獲得的細胞懸浮液以1000rpm離心10min,吸去上清液,在沉淀物中加入2
elisa分析檢測試劑盒檢測步驟2017/07/07
elisa分析檢測試劑盒檢測步驟ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。檢測方法雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:雙抗體夾心法一、將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。二、
進口elisa試劑盒雙抗體夾心法2017/07/03
進口elisa試劑盒雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加
進口elisa試劑盒注意事項如下2017/06/30
進口elisa試劑盒注意事項如下:1.正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行
elisa分析檢測試劑盒注意事項2017/06/28
elisa分析檢測試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請
elisa分析檢測試劑盒樣品收集2017/06/26
elisa分析檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感
elisa檢測試劑盒試劑盒組成2017/06/23
elisa檢測試劑盒試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240μg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑
elisa分析檢測試劑盒操作2017/06/21
elisa分析檢測試劑盒操作步驟:編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加
elisa分析檢測試劑盒樣本處理2017/06/19
elisa分析檢測試劑盒檢測原理ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會與HEV的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與*次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合
elisa分析檢測試劑盒原理2017/06/16
elisa分析檢測試劑盒實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴雌二醇(E2)水平。用純化的猴雌二醇(E2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌二醇(E2),再與HRP標記的雌二醇(E2)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中猴雌二醇(E2)濃度。操作步
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