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細胞培養實驗基本操作:
1、進無菌室前要洗手,按規定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
2、操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質,吸管再用時會將其帶到培養液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產生有毒氣體,危害培養細胞,同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用。
3、使用培養液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養液應立即封閉瓶口,培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
4、操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
5、吸取培養液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染。
6、操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發現原有的細胞遺傳物發生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。
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