單克隆抗體( mAbs )已經成為生物制藥工業中生長速度快的部分,具有先進的分子工程和抗體人源化技術,使得為多種醫學疾病如癌癥、自身免疫性疾病、心血管疾病和傳染病產生治療性抗體成為可能。
這些候選物初使用雜交瘤技術或抗原免疫后的初級B細胞篩選產生。在抗體發現過程中,初級篩選對于鑒定具有結合特異性、種間交叉反應性、選擇性和親和性等基本特性的細胞系具有重要意義。
接下來評估滿足這些特性的克隆的其它重要特性,這些特性可以包括IgG同種分型、抗體定量和細胞計數/健康,它們對于選擇鉛分子是必需的,如圖1所示。
小鼠抗體是使用酶聯免疫吸附測定( ELISA )從細胞上清液中定量的,這是一種常規技術,盡管如此,它是持久的并且僅測量一個終點,并且經常需要樣品稀釋和多次洗滌步驟。
除此之外,在獲得足夠的洞察用于抗體的下游克隆之前,必須進行其它測試,例如分離的IgG同種分型和細胞數量/健康。可以使用Intellicyt鼠標IgG類型和滴度試劑盒簡化這一傳統工作流程。
這是一種高通量多路分析,具有寬的動態范圍,避免了樣品稀釋和洗滌步驟。它提供了一個簡單的工作流程,能夠同時測量五個不同的端點:
高含量的數據使得單克隆和多克隆孔之間能夠快速區分。它告訴研究者產生了多少IgG,用于定量穩定克隆和下游功能測定。
它鑒定了同種型,有助于為PCR介導的基因克隆設計正確的引物。后,在進行RNA分離之前,它監測細胞的增殖和健康。
小鼠IgG類型和效價測定是Intellicyt綜合抗體發現平臺的一個組成部分。另一種解決方案是iQue Screener PLUS平臺,它可以加快數據采集速度,并使384孔板的分析微型化。經過20分鐘的數據采集,ForeCyt軟件提供了強大的數據挖掘工具,可以進行大規模雜交瘤/ B細胞篩選研究。
ForeCyt軟件上的Panorama功能提供了動態多板數據分析,包括具有用戶定義標準的圖譜,用于檢測和識別包含所需IgG同種型抗體濃度和細胞健康的樣品,這在分析大型多板篩選活動時非常重要。總之,小鼠IgG類型和滴度測定能夠簡化和加速抗體發現的工作流程,這意味著獲得可操作結果的時間更短。
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