當前位置:上海邦景實業有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 50T變形桿菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR 法)
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
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參數規格:
產品名稱:變形桿菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR 法)
產品規格:50T
產品貨號:BJP63509
產品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
鼠B淋巴瘤系拉丁屬名: Micrococcus luteus4-羥基吲哚Human RBM26 ELISA
雜交瘤規格: 冰袋泡沫盒快遞Bradykinin Fragment 1-7Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA
抗鼠CD4單克隆注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用Bradykinin Fragment 1-5Human RBP2 ELISA
雜交瘤CD25拉丁屬名: Bacillus nealsonii氯化耐爾藍Human RBM28 ELISA
人間質-永生化拉丁屬名: Debaryomyces hansenii var. fabryi鹽酸氨溴索Human RBM39 ELISA
人內膜癌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用鹽酸氨溴索Human RBM4 ELISA
人卵巢癌用途: 害蟲生物防治2-巰基苯并惡唑Human RBM19 ELISA
6T-CEM(人T白血病)用途: 研究2-巰基苯并惡唑Human RBMS1 ELISA
人肝癌(高轉)-熒光素梅標記拉丁屬名: Polaromonas vacuolata2-巰基苯并惡唑Human RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA
人原髓白血病-熒光素梅標記拉丁屬名: Enterobacter aerogenes Hormaeche and Edwards磺酸銀Human RBMS2 ELISA
人前列腺癌-熒光素梅標記拉丁屬名: Brucella sp.磺酸銀Human RBM25 ELISA
小鼠肺上皮-熒光素梅標記拉丁屬名: Halopelagius inordinatus乙基氯化鎂Human RBM26 ELISA
變形桿菌核酸檢測試劑盒(熒光PCR 法)L-異亮氨酸/L-異白氨酸/ L-異閃白氨基酸/L-α-氨基-β-甲基戊酸/L-IsoleucineFAM92A1 FAM92A1蛋白抗體100 ul
DL-異亮氨酸/DL-異白氨酸/ DL-2-氨基-3-甲基戊酸/DL-α-氨基-β-甲基戊酸/DL-異閃白氨基酸/DL-IsoleucineFAM98A FAM98A蛋白抗體100 ul
L-亮氨酸/L-白氨酸/L-閃白氨基酸/氨基異己酸/α-氨基-γ-甲基戊酸/α-氨基異己酸/L-2-氨基-4-甲基戊酸/L-α-氨基異丁基醋酸/L-LeucineILDR1 免疫球蛋白樣結構域受體1抗體100 ul
D-亮氨酸/D-白氨酸/D-2-氨基-4-甲基戊酸/(R)-2-氨基-4-甲基戊酸/D-LeucineILVBL 乙酰乳酸合成酶蛋白抗體100 ul
DL-亮氨酸/DL-白氨酸/DL-2-氨基-4-甲基戊酸/DL-LeucineBFSP2/Phakinin 晶狀體蛋白2抗體100 ul
BOC-L-亮氨酸/BOC-L-白氨酸/N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酸/BOC-L-LeucineGFAP delta 膠質纖維酸性蛋白GFAPδ抗體100 ul
N-乙酰-DL-亮氨酸/N-乙酰-DL-白氨酸/α-乙酰氨基異己酸/α-乙酰基異己酸/N-乙酰基-DL-亮氨酸/N-Acetyl-DL-LeucineNPTX2 神經穿透素2抗體100 ul
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