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我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產品說明書。
規格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產品名稱 | 人熱休克蛋白40(HSP-40)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10685 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
TNFRSF21 Others Mouse 小鼠 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) 毒死蜱(標準品)質量規格:分析標準品,99%Chlorpyrifos
CM-H093人顱蓋造骨細胞*培養基100mL滅蠅胺標準溶液(10μg/ml,u=2%)質量規格:10μg/ml,u=2%Cyromazin solution
LILRB1 Others Human 人 LILRB1 / CD85 / ILT2 / ILR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 多菌靈(分析標準品,99%)質量規格:分析標準品,99%Carbendazim
人直腸平滑肌細胞HRSMC(分析標準品,98%)質量規格:分析標準品,98%Carbaryl
Ca Ski細胞,人小腸頸部表皮樣癌細胞 人癌細胞,ZR75-1細胞 狗間充質干細胞-脂肪DMSC-ad鹽酸水蘇堿(標準品)質量規格:分析標準品Stachydrine
山羊腎上皮樣細胞;DG-K1N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀-d5質量規格:美國進口N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5
CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀質量規格:美國進口N,N-Didesmethyl Trimebutine
腮腺細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-去甲基鹽酸曲美布汀質量規格:美國進口N-Demethyl Trimebutine
高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd 人正常皮膚細胞,TE 353.Sk細胞 HO-8910(卵巢癌細胞)柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide
人神經膠質細胞瘤細胞;U251N-甲酰伐倫克林質量規格:美國進口N-Formyl Varenicline
CSF3 Others Human 人 G-CSF / GCSF 人細胞裂解液 (陽性對照) 二乙基乙酰與米酸酯,英文名或英文縮寫:Dietxyl acetamidomalonate,級別:BR,99%,規格:5毫克
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C52,2-二羌基二流代-6,6-聯 6-xy7noXY-2-NcPHTHYL DISULFIDq 6088-21-3
CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 聚醇縮,英文名或英文縮寫:PVF,級別:AR,99%,規格:5克
CM-M096小鼠表皮角質形成細胞*培養基100mL噻本隆shēng huà shì jì容量:25克
A-375 [A375], 人惡性素瘤細胞株 瘤細胞,U-937細胞 NCI-N87(人胃癌細胞)Polypeptone 500g原裝 Japan
人熱休克蛋白40(HSP-40)elisa進口試劑盒CNE-1 高分化鼻咽癌細胞人參皂苷Rb1(標準品)Ginsenoside Rb1質量規格:HPLC≥98%,標準品
P9-EGFP-puro小鼠骨髓基質細胞 P9-EGFP-puro mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+1%P/S人參皂苷Rb2(標準品)Ginsenoside Rb2質量規格:HPLC≥98%,標準品
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)人參皂苷Rb3(標準品)Ginsenoside Rb3質量規格:HPLC≥98%,標準品
人心肌細胞 (HCMa) (1×106 ) RGC-5, 小鼠視網膜神經節細胞 Mouse人參皂苷Rc(標準品)Ginsenoside Rc質量規格:HPLC≥98%,標準品
小鼠T細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)人參皂苷Rd(標準品)Ginsenoside Rd質量規格:HPLC≥98%,標準品
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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