當前位置:上海邦景實業有限公司>>核酸檢測試劑盒>>PCR-熒光探法>> 48T 0.1PCR管pRice-Eactin基因核酸檢測試劑盒
參數規格:
產品名稱:pRice-Eactin基因核酸檢測試劑盒
產品規格:48T 0.1PCR管
產品貨號:BJP64890
產品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。?
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
b、內參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。
大豆素,黃豆苷元(標準品)英文名稱: Tryptone 產品別名: 2-吡啶甲酸乙酯
大風子(標準品)英文名稱: β-Naphthoflavone產品別名: 4-氯吲哚
大腹皮(標準品)英文名稱: Clorsulon產品別名: 2,4-二氨基苯磺酸
大果木姜子(標準品)英文名稱: Clorsulon產品別名: 3,3,3-三氟酸
大紅袍(標準品)英文名稱: Sodium L-ascorbyl-2-phosphate產品別名: 2-溴-4'-羥基苯乙酮
大黃(掌葉大黃)(標準品)英文名稱: 3-Isobutyl-1-methylanxthine產品別名: 1-烯基萘
大黃(藥用大黃)(標準品)英文名稱: Procaine hydrochloride產品別名: 4-氨基-2-甲酸
大黃酚(標準品)英文名稱: Procaine hydrochloride產品別名: 3-氯-4-氨基苯甲酸
大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標準品)英文名稱: Vorinostat impurity產品別名: 3-硝基-1,2,4-三唑
大黃素(標準品)英文名稱: Swertianolin產品別名: 雙乙酰乙酰對苯二
大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)英文名稱: saponin產品別名: 2-叔丁基-5-酚
大黃素甲(標準品)英文名稱: Aloperine產品別名: L-纈氨酸芐酯鹽酸鹽
谷氨酸受體紅藻氨酸離子3/谷氨酸受體7抗體 Daurisoline 質量規格:≥96%,標準品
谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/3抗體 1-(Bromomethyl)naphthalene 質量規格:>99%
離子型谷氨酸受體4抗體 (R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate 質量規格:>99%
磷酸化離子型谷氨酸受體4抗體 2,6-Dichloropurine 質量規格:>97%,*
代謝型谷氨酸受體1A抗體 2,4-Dichloroquinazoline 質量規格:>98%
周期蛋白依賴性激酶調節亞基2抗體 9-(Chloromethyl)anthracene 質量規格:>98%,進口原裝
β腎上腺素能受體激酶2抗體 Ethyl ferulate 質量規格:HPLC≥98%,標準品
腺苷酸環化酶Gα蛋白/Gαs/olf抗體 CAPS 質量規格:>99%
周期蛋白G相關激酶抗體 Crotonoside 質量規格:HPLC≥98%,標準品
pRice-Eactin基因核酸檢測試劑盒綠色木霉Anti-CXCR4 Antibody僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
檸檬黃色紅色桿菌Anti-CXCR5 Antibody拉丁屬名: Erythrobacter citreus
橙黃紅酵母Anti-CXCR4 Antibody拉丁屬名: Rhodotorula aurantiaca
季也蒙假絲酵母Anti-CXCR6 Antibody拉丁屬名: Candida guilliermondii
釀酒酵母Anti-CXCR6 Antibody拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
黑木耳Anti-CYBB Antibody拉丁屬名: Auricularia auricula
黑腐皮殼菌Anti-CYBB Antibody僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
蠟狀芽孢桿菌Anti-CXCR6 Antibody拉丁屬名: Bacillus cereus
解脂耶氏酵母Anti-CYCS Antibody拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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