當前位置:上海邦景實業有限公司>>生化檢測試劑盒>>脂肪酸代謝系列>> 肉毒堿棕櫚酰轉移酶測試盒50管/48樣
貨號 | BJ-01S9859 |
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操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
可見分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01S9859 |
商品介紹:
測定意義:
肉毒堿棕櫚酰轉移酶是存在于線粒體內膜的一類?;D移酶。可逆地催化從?;鶎Ⅴ;D移至L-肉毒堿的反應,在轉運脂肪酸通過線粒體內膜的過程中起重要作用。
測定原理:
基于肉堿和脂酰在丙二酰存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉移酶(CPT-I)的作用,產生脂酰肉堿,并釋放出巰基(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應后,產生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 UGT1A10 基因全長ORF克隆
人 SIAE 基因全長ORF克隆
人 GCNT4 基因全長ORF克隆
人 ASPN 基因全長ORF克隆
人 WNT16 基因全長ORF克隆
人 EPOR 轉錄變體2 基因全長ORF克隆
人 C8G 基因全長ORF克隆
人 CD2AP 基因全長ORF克隆
人 TMED1 基因全長ORF克隆
人 TMEM27 基因全長ORF克隆
肉毒堿棕櫚酰轉移酶測試盒50管/48樣人抗外切體成分10(EXOSC10)抗體免疫試劑盒進口、分裝
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