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備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
產品名稱 | 人白介素3(IL-3)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human interleukin 3 (IL-3) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10173 |
規格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
元鹽酸氟西汀Meta Fluoxetine 質量規格:美國進口 guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規格:96T/48T 人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
伐地那非三水合鹽酸鹽Vardenafil trihydrate質量規格:>98%,三水合物 真菌/酵母細胞內氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20 小鼠肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)試劑盒 Mouse Hepatocyte Growth Factor Receptor,C-MET/HGFR ELISA Kit
伐地那非三水合鹽酸鹽(標準品)Vardenafil trihydrate質量規格:HPLC>98%,標準品 MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 血小板生長因子(PGF)ELISA試劑盒 ,英文名: PGF ELISA Kit
抑氨肽酶,烏苯美司,貝他定,苯丁抑制素Bestatin,Ubenimex質量規格:>98.5%,BR,可用于細胞培養 小鼠前列腺酸性1酸酶(ACP3)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP3 ELISA Kit MouseChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA試劑盒小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
牛結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA檢測試劑盒BovineHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 96T/48T 23599-69-1去甲異波爾定廠家 Norisoboldine
人apelin 13(AP13)試劑盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit 107316-88-1去甲澤拉木醛說明書 Demethylzeylasteral
英文名稱MouseIerleukin-3,IL-3ELISAKIT小鼠白介素3(IL-3)規格:96T/48T 2680-81-1去氫二異丁香酚品牌 Dehydrodiisoeugenol
冰凍切片中性脂質油紅O染色試劑盒50 去氫茯苓酸規格 Dehydropachymic acid
Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒大鼠膽酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 1630-94-4去氫鉤藤堿廠家 corynoxeine
480-39-7喬松素廠家 Pinocembrin 植物活性內質網分離試劑盒10
480-36-4蒙花苷品牌 Buddleoside 植物核同糖1,5二1酸羧化/加氧酶活化酶(RUBPCase/RubiscoActivase)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20
480-36-4蒙花苷品牌 Buddleoside 植物根瘤原生質細胞分離試劑盒5
480-19-3異鼠李素規格 Isorhamnetin 植物鈣調素(CAM)ELISA檢測試劑盒Placalmodulin,CAMELISAKit 96T/48T
480-18-2花旗松素說明書 Taxifolin 植物鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20
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犬維生素A(VA)試劑盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit 84680-75-1黃芪皂苷I說明書 Astragaloside I
英文名稱HumanGlycoprotein96ELISAKit人腫瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA試劑盒規格:96T/48T 84676-89-1黃芪皂苷II品牌 Astragaloside II
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒50 84687-42-3黃芪皂苷Ⅲ規格 Astragaloside III
RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISA試劑盒大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 17429-69-5黃芪總皂苷廠家 Astragaloside
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