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產地 | 國產 | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領域 | 科研 | 貨號 | BJ-PJ6333 |
規格 | 1ml | 包裝 | 盒 |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
RNAlong RNA 長期保存液
商品屬性:
產品分類 | 規格 | 貨號 |
核酸純化 | 1ml | BJ-PJ6333 |
商品介紹:
保存條件:4℃。
產品介紹:
RNA性質不穩定,極易降解。溶解于無RNase的TE 或水中的純化RNA,即便是儲存于-20 oC也難免降解。為解決這一問題,可以將RNA沉淀或RNA溶液溶解于RNA 長期保存液中,允許RNA 4oC保存或-20oC至少保存1年而免于降解。RNA長期保存液是RNA樣品運輸和中長期保存的佳選擇。需要時可用常規乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取儲存于RNA 溶解保護液中的高濃度RNA(可達4 mg/ml)進行RNA 電泳、Northern Blot。
注意事項:
1. RNA 長期保存液可能抑制逆轉錄酶活性,做 RT-PCR 反應前應該用乙醇沉淀 RNA。
2. 在 RNA 長期保存液中的 RNA 的終濃度不應該超過 4μg /μl。用 RNA 長期保存液溶解 RNA 沉淀:
1. 對固體 RNA 沉淀,每 0.4-4μg RNA 沉淀加入 1μl RNA 長期保存液,反復吹打混勻或者室溫振蕩 15-30 min 溶解沉淀。干燥的 RNA 沉淀難以溶解,可反復吹打混勻后 50oC 加熱 10-15 min。最好先用小體積無 RNase 的TE 或水溶解 RNA 沉淀,然后按液態 RNA 操作。
2. 對液態 RNA 溶液,每 0.4-4μg RNA 溶液加入 1μl RNA 長期保存液,混勻。注意混合液中 RNA 長期保存液的體積百分比不低于 80%。
3. 測定 OD 值。注意加入相應量的 RNA 長期保存液做空白。
4. 將溶解的 RNA 樣品儲存于-20 oC 或者-70 oC。從 RNA 長期保存液中沉淀 RNA:
1. 估計 RNA 溶液終體積。加入 4 倍體積的無水乙醇,混勻。如果溶液體積過小,可加入 RNase free water 稀釋 RNA 溶液,如果溶液中 RNA 含量低于 0.25μg /μl,可加入 5M NaCl(RNase free) 至終濃度 0.2M,混勻后再加入 4 倍體積乙醇。
2. 室溫放置 5 min。
3. 12,000rpm 離心 5 min,棄上清,風干,溶解。
4. 重新沉淀的 RNA 溶解后可用于 RT-PCR 反應。也可用于任何其他實驗。直接使用 RNA 長期保存液中的 RNA:直接吸取 RNA 長期保存液中的 RNA,進行普通或甲醛變性電泳和 Northern Blot。進行甲醛變性電泳時,最后上樣的樣品中的 RNA 長期保存液的濃度可高達 50%。
附:甲醛變性電泳樣品準備: 臨用前,混合水(87μl),甲醛(81μl),50%甘油/含 0.25 mg/ml 溴芬蘭(48μl ) 和20X MOPS (24μl). 將上述混合液和 RNA 長期保存液中的 RNA 樣品等體積混合,55 oC 溫育 10 min,按照標準的甲醛變性電泳過程上樣。
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