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H9細胞專用因子Y27632(相關3)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 15:24:03瀏覽次數(shù):138次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 加工定制
適用領域 科研 貨號 FS-01X9934
H9細胞專用因子Y27632(相關3)公司正在出售的產(chǎn)品:腦動脈血管內(nèi)皮細胞規(guī)格:5 × 105次方(1ml)
腦動脈血管平滑肌細胞規(guī)格:5 × 105次方(1ml)
腦靜脈血管內(nèi)皮細胞規(guī)格:5 × 105次方(1ml)

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

產(chǎn)品屬于:

產(chǎn)品名稱:H9細胞專用因子Y27632(相關3)    

產(chǎn)品規(guī)格:1mg

貨號:FS-01X9934

保存溫度(℃):/-20℃

運輸溫度(℃):/-20℃(干冰)   

98.jpg 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

 Cyclical Citrullinated Peptide (CCP)環(huán)胍(CCP)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Cadherin, Osteoblast (CDHOB)造骨細胞鈣黏蛋白(CDHOB)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Anti-Filaggrin Antibody (AFA)抗絲聚蛋白(AFA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Antidiuretic Hormone (ADH)抗利尿(ADH)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Anti-Ovarian Antibody (AOAb)抗卵巢抗體(AOAb)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Anti-Type II Collagen Antibody (Anti-CIIAb)抗Ⅱ型膠原蛋白抗體(Anti-CⅡAb)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Nucleoporin 153kDa (NUP153)153kDa核孔蛋白(NUP153)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase 1 (MAP3K1)絲裂原激活蛋白激激激1(MAP3K1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Anti-OJ Antibody抗OJ抗體(Anti-OJ)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Anti-Histone Antibody (AHA)抗組蛋白抗體(AHA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Phospholipase A1 (PLA1)磷脂A1(PLA1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Nucleoporin 133kDa (NUP133)133kDa核孔蛋白(NUP133)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Fibrinogen Alpha (FGa)纖維蛋白原α(FGα)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Mitogen Activated Protein Kinase 8 (MAPK8)絲裂原激活蛋白激8(MAPK8)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Nucleoporin 155kDa (NUP155)155kDa核孔蛋白(NUP155)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Tetraspanin 27 (TSPAN27)四旋蛋白27(TSPAN27)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Caspase 10 (P10)胱天蛋白10(P10)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Thioredoxin Binding Protein 2 (TBP2)硫氧還蛋白結合蛋白2(TBP2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T
H9細胞專用因子Y27632(相關3)SKP1  S期激相關蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

SHFM3  SHFM3蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

ROC1/RNF75  環(huán)指蛋白75抗體規(guī)格: 0.2ml

RIT1  RIT1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

FbxW2  FbxW2蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Fbxw7/CDC4  Fbxw7蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

FBXW8/FBXO29  FBXW8蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Fbx15  Fbx15蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。


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