產品屬于：

產品名稱：結腸癌細胞    

產品英文：cx-1

貨號：FS-01X9632

細胞培養條件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生長狀態：貼壁生長

產品規格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：提供STR鑒定報告

保存培養溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫    

細胞培養的優點：

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗（Abbioscience公司），然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡(Leica公司)下觀察圖像并拍照。

N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)重組蛋白    Recombinant N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase)

Pim-2原癌基因(PIM2)重組蛋白    Recombinant Pim-2 Oncogene (PIM2)

Pim-3原癌基因(PIM3)重組蛋白    Recombinant Pim-3 Oncogene (PIM3)

POTE錨蛋白域家族成員G(POTEG)重組蛋白    Recombinant POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)

P選擇素(SELP)重組蛋白    Recombinant Selectin, Platelet (SELP)

P-選擇素糖蛋白配體1(PSGL1)重組蛋白    Recombinant P-Selectin Glycoprotein Ligand 1 (PSGL1)

RAD23同源物B(RAD23B)重組蛋白    Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)

RAD51同源物(RAD51)重組蛋白    Recombinant RAD51 Homolog (RAD51)

RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)重組蛋白    Recombinant RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)

Ras相關C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)重組蛋白    Recombinant Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)

RNA結合基元蛋白20(RBM20)重組蛋白    Recombinant RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20)

RNA結合基元蛋白24(RBM24)重組蛋白    Recombinant RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24)

Runt相關轉錄因子2(RUNX2)重組蛋白    Recombinant Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2)

R-脊椎蛋白1(RSPO1)重組蛋白    Recombinant R-Spondin 1 (RSPO1)

R-脊椎蛋白3(RSPO3)重組蛋白    Recombinant R-Spondin 3 (RSPO3)

S100鈣結合蛋白(S100)重組蛋白    Recombinant S100 Calcium Binding Protein (S100)

S100鈣結合蛋白A11(S100A11)重組蛋白    Recombinant S100 Calcium Binding Protein A11 (S100A11)

S100鈣結合蛋白A12(S100A12)重組蛋白    Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)

S100鈣結合蛋白A13(S100A13)重組蛋白    Recombinant S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13)

S100鈣結合蛋白B(S100B)重組蛋白    Recombinant S100 Calcium Binding Protein B (S100B)

Smad同源物7(Smad7)重組蛋白    Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)

ADAMTS8    整合素樣金屬蛋白酶與8型抗體     細黃鏈霉菌

ADAMTS9    整合素樣金屬蛋白酶與9型抗體     藤黃色鏈霉菌

ARP4    血管生成素樣蛋白4抗體     黃色長孢鏈霉菌

ADAMTS10    整合素樣金屬蛋白酶10型抗體     吸水鏈霉菌

APEX2    嘌呤嘧啶核酸內切酶2抗體     灰色鏈霉菌

AD7C-NTP    神經絲蛋白抗體     淺灰鏈霉菌

beta Amyloid 1-28    β淀粉樣肽（1-28）抗體     球孢鏈霉菌

Aurora B    有絲分裂激酶B抗體     青色鏈霉菌

Aggrecanase-2    軟骨蛋白聚糖抗體     鏈霉菌

ADAM10    去整合素樣金屬蛋白酶10抗體     滅蚊鏈霉菌

ASB9    含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體     燼灰鏈霉菌

結腸癌細胞ASB8    含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體     產色鏈霉菌

ABP1    植物生長激素ABP1抗體     雙重輪絲鏈霉菌

ACTR1A    肌動蛋白相關蛋白1抗體     鏈霉菌

AHSP    α紅細胞分化相關因子抗體     白色鏈霉菌

ATP1    血管緊張素激活蛋白1抗體     白黃鏈霉菌

AFM    Alpha清蛋白抗體     紫色小單孢菌(絳紅小單孢菌)

AFAP1L2    AFAP1L2抗體     嗜熱乳酸鏈球菌