當前位置:上海邦景實業有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸電泳及回收>> 15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌
產地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
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適用領域 | 科研 |
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應注意哪些問題?
答:15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌當DNA 段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌的詳細介紹:
DNA提取流程圖:公司15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產品:點擊了解更核酸電泳及回收。
1、RNA純化系列產品
2、DNA純化系列產品
3、電泳及回收系列產品
4、探針標記及檢測系列產品
5、核酸擴增系列產品
6、克隆表達系列產品
7、基因組研究系列產品
8、蛋白質研究系列產品
9、細胞生物學研究系列產品
10、即用型溶液、質粒庫、菌種庫等等
實驗步驟:
(1)15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
注意事項:
● 15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應等,不會影響后續試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。
四氫甲基嘧啶羧酸(>98%,BR) Ectoine 96702-03-3 質量規格:>98%,BR
四螨嗪標準溶液(10μg/ml,u=6%) Clofentezine solution 74115-24-5 質量規格:10μg/ml,u=6%
四螨嗪標準溶液(100μg/ml,u=4%) Clofentezine solution 74115-24-5 質量規格:100μg/ml,u=4%
四螨嗪(分析標準品,98.6%) Clofentezine 74115-24-5 質量規格:分析標準品,98.6%
四螨嗪(標準品) Clofentezine 74115-24-5 質量規格:分析標準品,98.6%
四硫富瓦烯(>98.0%(GC)) Tetrathiafulvalene 31366-25-3 質量規格:>98.0%(GC)
四甲基錫(>96.0%(GC)) Tetramethyltin 594-27-4 質量規格:>96.0%(GC)
四甲基氯化銨(>99%,BR) Tetramethylammonium chloride 75-57-0 質量規格:>99%,BR
四己基碘化銨(>98.0%(T)) Tetrahexylammonium Iodide 2138-24-1 質量規格:>98.0%(T)
四環素磷酸復鹽 Tetracycline phosphate complex 1336-20-5 質量規格:美國進口
四環素-d6 Tetracycline-d6 60-54-8 (unlabeled) 質量規格:美國進口
四環素10-O-b-D-半乳糖皮蒽 Tetracycline 10-O-b-D-galactopyranoside 319426-63-6 質量規格:美國進口
四環素(國產) Tetracycline 60-54-8 質量規格:BR,國產
四環素 Tetracycline 60-54-8 質量規格:進分
四庚基溴化銨(>98%,BC) Tetraheptylammonium bromide 4368-51-8 質量規格:>98%,BC
四庚基碘化銨(>98.0%(T)) Tetraheptylammonium Iodide 3535-83-9 質量規格:>98.0%(T)
四氟鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)) Tetrafluorophthalonitrile 1835-65-0 質量規格:>98.0%(GC)
四丁基碘化銨(離子對色譜級) Tetrabutylammonium iodide 311-28-4 質量規格:離子對色譜級
四丁銨雙(馬來腈基二硫醇)鎳(Ⅲ)絡合物(>90.0%(T)) Tetrabutylammonium Bis(maleonitriledithiolato)nickel(III) Complex 55401-12-2 質量規格:>90.0%(T)
15mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個品牌Fmoc-Gabapentin規格:美國進口
Fmoc-Asp(OH)-OtBu規格:>98.5%,BR
Fmoc-Asn(Trt)-OH規格:>98%,BR
Fmoc-Ala-OH規格:>98%,BR
Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH規格:HPLC>98%
Fmoc-3-benzoyl-erythro-sphingosine規格:美國進口
Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine規格:0.98
Fmocchloride規格:用于HPLC衍生化,≥99.0%(HPLC)
Fluvoxaminemaleate規格:>98.5%,BP2007
Fluvoxaminemaleate規格:HPLC>98%,標準品
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