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RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達感受態

參  考  價:1248
具體成交價以合同協議為準
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  • 廠商性質

    經銷商

  • 所在地

    上海

規格

10T 1248元 10盒可售

更新時間:2023-11-30 14:33:29瀏覽次數:301次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研
RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達感受態產品儲存:TRzol在室溫下能穩定保存12個月。盡管如此,為達到最佳效果,我們建議保存在2-8℃的環境下。

商品屬性:

產品名稱

產品分類

規格

貨號

RTS   BL21(DE3)Chaprone助溶表達感受態

克隆相關

10T

BJ-PJ6651

 

描述:BL21(DE3) Chaprone 感受態細胞中含有分子伴侶蛋 白質粒,其表達產物可協助重組蛋白正確折疊形成可溶活性 蛋白。分子伴侶蛋白質粒為抗性(chloramphenicol, Cmr)的表達受控于四環素(tetR)操縱子,因此該感受態 不適用于抗性表達質粒的轉化。 本品使用  的化學感受態技術制備, 其室溫可保存 3 天、-20°C 可保存 2 年(推薦保存溫度)、 -80°C 可長期保存性能無下降。運輸過程中無需干冰,可常 規冰袋運輸(推薦運輸溫度)。該感受態細胞為熱激感受態 細胞,轉用于蛋白表達(不可用于克隆和載體構建),經 42°C 熱激 1min 可獲得 105~106 cfu/μg 效價,可滿足質粒轉化要 求。該制品使用簡單、運輸、儲存方便。 

組分
RTS BL21(DE3)Chaprone Competent Cell(10T) 1 瓶
Nano E.coli Transfection Reagent 1 mL
儲存:RTS 系列感受態為干粉形式,均可室溫保存 3 天,長期保存-20°C(2 年)。經 Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受態必須分裝后,并于-60°C 以下保存。溶解后的感受態細胞避免反復凍融,在-60°C 以下可保存 6 個月。
操作方法
1. 從-20°C 冰箱中取出 Nano E.coli Transfection Reagent融化,放置于冰上。取 300 μl Nano E.coli TransfectionReagent 加入到一支凍干感受態細胞中,并分裝到 10 支 1.5ml EP 管中(每支 30 μl),于-60°C 以下保存(或立即使用)。
2. 將 10~100 ng 質粒 DNA(不可使用連接產物、不可使用篩選標記質粒)加入到分裝的感受態細胞中,輕彈EP 管(或槍頭輕輕吹打),置于冰上 15min。
3. 置于 42°C 熱激 1 min 后,迅速置于冰上急冷 2 min。
4. 熱激完畢后,向上述感受態細胞中加入 450 μL 不含抗生素的 SOC(或 LB)培養基,37 °C 振蕩(225 rpm)培養60 min。使質粒上抗性標記基因表達,菌體復蘇。
5. 取200 μl復蘇菌液涂布到含相應抗生素的LB瓊脂平板表面。(含相應質粒抗生素和 20 μg/ml )
6. 將平板置于 37 °C 培養,12~18 小時后可出現菌落。
7. 挑選生長良好的菌落,接入 LB 培養基(含相應質粒抗生素,20 μg/ml),37 ℃劇烈振蕩培養過夜。
8. 1/50 比例接入新的 LB 培養基(含相應質粒抗生素,20μg/ml ,0.5 mg/ml L-阿拉伯糖)37 ℃劇烈振蕩培養至菌體密度 OD600 約 0.3(約 2h)。
9. 加入終濃度 2 ng/ml 四環素(誘導 chaprone 伴侶蛋白表達),37℃劇烈振蕩培養至 OD600 約 0.5(約 2~4h)。
10. 加入適量 IPTG(0.1-1 mM), 15℃振蕩培養 24h(培養搖床無法制冷條件下,室溫誘導 8~12h)。
11. 4,000 rpm 室溫離心 15 min,收集細胞,進行蛋白表達和可溶性表達分析。


下列是公司正在出售的產品:

鋅指蛋白230抗體 英文名;RNF141/ZNF230

細胞質多聚腺苷酸結合蛋白2抗體 英文名;CPEB2

癌胚抗原相關細胞粘附分子19抗體 英文名;CEACAM19

Toll樣受體6抗體 英文名;TLR6

CSMD3蛋白抗體

酪啡肽β/?-casomorphin抗體

磷酸化多巴胺/cAMP調節神經磷蛋白抗體 英文名;Phospho-DARPP32   (Thr34)

APC標記小鼠H-2Db單克隆抗體

CSMD2蛋白抗體 英文名;CSMD2

跨膜蛋白Sema3C抗體 英文名;Sema3C

微管相關同源蛋白TPX2單克隆抗體 英文名;TPX2

APC標記小鼠CD90單克隆抗體 英文名;mouse CD90/APC

RAS相關GTP結合蛋白C抗體 英文名;RRAGC

松弛肽/松弛素抗體 英文名;Relaxin 1 + Relaxin 2

膠原樣蛋白抗體

PE-Cy7標記人/小鼠CD11b單克隆抗體 英文名;human/mouse   CD11b/PE-Cy7

型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體

肌動蛋白依賴染色質調控因子SMARCD3蛋白抗體

間隙連接蛋白26/GJB2抗體 英文名;Connexin 26

1號染色體開放閱讀框163抗體

型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白/III型膠原抗體 英文名;Collagen III

磺氨基葡糖硫酸胺酶抗體 英文名;SGSH

纖維母細胞生長因子受體底物3抗體

1號染色體開放閱讀框162抗體 英文名;C1orf162

鋅指蛋白430抗體

RTS   BL21(DE3)Chaprone助溶表達感受態磷酸化剪接因子1抗體

 


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