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商品屬性:
產品名稱 | 產品分類 | 規格 | 貨號 |
Bst 4.0 Basic Mix (液體預混) | 恒溫擴增系列 | 100Tx20μl | BJ-PJ6565 |
該制品為單一組分的 MasterMix(2 倍濃度),包含了反應緩沖液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時只需要加入引物、模板即可進行核酸恒溫擴增。Bst4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉錄),還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無論DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進行高效的恒溫擴增。該制品是進行 LAMP 及 RT-LAMP 擴增反應的試劑。優化的反應體系,確??焖俚耐瓿蓹z測試劑的反應體系建立。該系列產品不包含任何其它輔助染料,在 LAMP 的擴增搭配 OG 橙綠變色管進行可視化變色反應。除此外,該制品還可以用于其它恒溫擴增實驗,包括 CPA、SMAP 等。
儲存:長期保存制品于-20℃,保存 2 年。
使用實例(以 LAMP OG 橙綠變色為例)橙綠變色染料(OG Dye)以凍干的形式預加在 8 聯管蓋上。在 LAMP 反應完畢后(在反應完畢前,務
必不能將管蓋上染料混入反應液中),將 0.2ml EP 管顛倒溶解 OG 染料后。LAMP 的反應產物將與 OG 染料形成強烈的綠色肉眼可見變色反應(陽性),而未發生擴增的 EP管為深橙色(陰性)。
(1)配制反應體系
在 0.2ml EP 反應管中加入下述試劑
2xBst 4.0 Basic Mix 10 μl
*10xLAMP Primer Mix 2 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 20 μl
*10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分別為 4 μM、F3/B3 分別為 2 μM全部試劑加入完畢后,輕彈 EP 管底部后,再蓋上 OG 橙綠變色管(蓋上管蓋后務必不能再劇烈混合與倒置,以防止將管蓋上的 OG 染料溶解,OG 染料一旦混入反應液中將會終止 LAMP 反應)。
實驗 LAMP Primer Mix 分別采用 1、1.5、2 μl,以陰性不變色,陽性樣品正常變色為標準,作為后續測試用量。
(2)反應體系配好后,置于 60~68°C(實驗采用65°C)進行反應 20~45min。(擴增良好的引物組合,通常 25min 即可變色,一般不超過 45min,實驗設置20、25、30、45min)。
(3)觀察結果:觀察結果時,盡可能不要與配制反應空間共用,以防止污染操作臺。將反應 EP 管倒置,并手腕輕甩,反應液浸泡 EP 管蓋上的 OG 染料,靜置 30s。再將 EP 反應管正置,并輕甩反應液到 EP 管底部,此時擴增樣品將變為鮮艷肉眼可見綠色,而陰性未發生擴增的管將為深橙色。
注意事項
1. 在用于其它恒溫擴增反應時(如 CPA、SMAP 等),可參考如上策略進行使用,反應時間可能會需要調整。
2. 關于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應體系后,可加入一滴礦物油覆蓋于反應液上部,以減少氣溶膠的污染。
3. 鑒于特殊的生產工藝, 全系恒溫擴增 Mix 系
列均不能進行濁度分析。
下列是公司正在出售的產品:
鋅指蛋白180抗體 英文名;ZNF180 | 細胞信號轉導分子Smad-2抗體 英文名;Smad2 |
δ樣蛋白4抗體 英文名;DLL4 | Ten-eleven轉運基因1蛋白抗體 英文名;TET1 |
COL10A1重組兔單克隆抗體 | 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗Human IgE單克隆抗體 |
磷酸化蛋白激酶C zeta 抗體 英文名;phospho-PKC zeta (Thr560) | APC標記人IL-17A單克隆抗體 |
Coilin蛋白抗體 英文名;Coilin | 跨膜蛋白176A抗體 英文名;TMEM176A |
微管蛋白γ/Tubulin γ抗體 英文名;gamma tubulin | APC標記人IFN-γ單克隆抗體 英文名;human IFN-γ/APC |
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體 英文名;RAB40A | 死亡受體3抗體 英文名;DR3 |
堿性磷酸酶(腸型)抗體 | PE-Cy5標記人CD55單克隆抗體 英文名;human CD55/PE-Cy5 |
9號染色體開放閱讀框40抗體 | 肌動蛋白輔助蛋白類樣蛋白抗體 |
鉀離子通道蛋白家族成員3抗體 英文名;KCNE3 | 19號染色體開放閱讀框7抗體 |
9號染色體開放閱讀框3抗體 英文名;C9orf3 | 環指蛋白56抗體 英文名;RNF56 |
細胞周期依賴性激酶抑制相關蛋白抗體 | 19號染色體開放閱讀框77抗體 英文名;C19orf77 |
鋅指蛋白340抗體 | Bst 4.0 Basic Mix (液體預混)磷酸化紅細胞膜條帶4.1蛋白抗體 |
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