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堿性蛋白酶可見分光光度法檢測試劑盒

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 10:43:32瀏覽次數:297次

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貨號 GOY-01S6628
堿性蛋白酶可見分光光度法檢測試劑盒公司正在出售的產品:84676-89-1黃芪皂 II 規格: HPLC≥98%,10mg/vial
二基-(2-基)甲 規格: 50mg
119425-89-7龍血A 規格: HPLC≥98%;20mg
黃柏對照藥材 規格: 1g
87205-99-0二氫丹參I 規格: HPLC≥98%,20mg/支
37271-16-2番瀉C 規格: HPLC≥98%;10mg

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

28.png 

商品屬性:

產品名稱

堿性蛋白酶可見分光光度法檢測試劑盒

規格

50管/24樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6628

商品介紹:

測定意義

AKP是指在堿性條件下催化蛋白質肽鍵水解的酶類,屬于蛋白酶。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉酯及轉肽的功能。該酶是主要工業用酶之一,廣泛應用于制藥、絲綢、食品、制革等行業。

測定原理:

在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成;在堿性條件下,還原磷鉬酸生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,測定680nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔510分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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吉馬酮 分析標準品,≥99%Anti-Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290)  化絲裂原活化蛋白激激8抗體人血紅蛋白β(HBβ)聯免疫吸附測定試劑盒

龍膽苦苷 分析標準品,≥98%Anti-MATH1  腸道分化干MATH-1蛋白抗體人血紅素氧化1(HO1)聯免疫吸附測定試劑盒

銀杏內酯 J  分析標準品,≥99%Anti-Morphine  單克隆抗體人血紅素氧化2(HO2)聯免疫吸附測定試劑盒

銀杏(C15:1) 分析標準品,≥99%Anti-Morphine  抗體人血漿抗凝蛋白C(PC)聯免疫吸附測定試劑盒  

銀杏(C13:0) 分析標準品,≥98% Anti-Morphine  抗體人血漿抗凝蛋白S(PS)聯免疫吸附測定試劑盒  

分析標準品,≥95%Anti-Torc2/Crtc2  CREB轉錄共激活因子TORC2抗體人血漿硒蛋白P(SEPP1)聯免疫吸附測定試劑盒

石杉堿乙 分析標準品,≥99%Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171)  化CREB轉錄共激活因子TORC2抗體人血凝素(HA)聯免疫吸附測定試劑盒

鹽去氫駱駝蓬堿 分析標準品,≥98%Anti-Morphine  單克隆抗體人血清/糖皮質激素調節激2(SGK2)聯免疫吸附測定試劑盒

異鼠李素 90%Anti-Amphetamine  單克隆抗體()人白蛋白(ALB)聯免疫吸附測定試劑盒

異鼠李素 分析標準品,>98%(HPLC)Anti-MEK1/2(MAPKK1)  絲裂原活化蛋白激激1抗體人血清淀粉樣蛋白A(SAA)聯免疫吸附測定試劑盒

異鼠李素 >98%(HPLC)Anti-MEK2/MAPKK2  絲裂原活化蛋白激激2抗體人信號素4C (SEMA4C)聯免疫吸附測定試劑盒

歐前胡素 分析標準品,≥98%Anti-MAPKAP Kinase 2  絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體人紅補體受體1 (CR1)聯免疫吸附測定試劑盒

異阿魏 分析標準品,≥98%Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr222)  化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體人脂球因子8 (MFG-E8)聯免疫吸附測定試劑盒

異佛手柑內酯 分析標準品,≥98%Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr334)  化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體人血清素轉運體(SERT)聯免疫吸附測定試劑盒

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