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ATCC細胞培養技術注意事項2017/3/21
1.ATCC細胞實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株...
植物細胞組織培養玻璃器皿介紹2017/3/16
ATCC細胞在組織培養中應使用硼硅酸鹽玻璃器皿或堿性溶解度小的硬質玻璃器皿,因鈉玻璃對組織培養的材料來說通常是有毒害的,特別是在進行長時間重復使用時毒害會更明顯,長時間地貯藏母液,也需要用玻璃瓶。培養...
細胞排列的模式分析2017/3/14
研究人員一直在研究控制ATCC細胞的方法,以觀察兩個細胞膜之間的直接接觸,或控制它們保持各種距離,研究細胞之間是怎樣通訊的。聲鑷的價值在于可用它來研究細胞之間的信息傳遞。它能把細胞分開的距離,或讓細胞...
人肺動脈成纖維細胞培養的過程分析2017/3/9
細胞株準備工作準備工作對開展人肺動脈成纖維細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行.準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑...
ATCC細胞的凍存注意事項和簡便方法2017/3/7
ATCC細胞注意事項:1.使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結構,以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時戴上手套操作。2.不...
血細胞的分離技術操作方法2017/3/2
(一)材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml,市...
ATCC細胞培養方法分析2017/2/28
1.ATCC細胞玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;...
細胞培養過程中預防污染可從以下幾方面著手2017/2/23
(一)細胞系從操作者做起1、操作者責任心要強,要細心穩重,操作技術要熟練。進無菌室前要用肥皂洗手或用5%新潔爾滅浸泡5分鐘,按規定穿隔離衣。進入后關好門,坐下來盡量少走動。工作開始要先用75%酒精棉球...
原代細胞體外培養細胞的分型2017/2/21
原代細胞體外培養細胞的分型(一)原代細胞貼附型:大多數培養細胞貼附生長,屬于貼壁依賴性細胞,大致分成以下四型:1、成纖維細胞型:胞體呈梭型或不規則三角形,中央有卵圓形核,胞質突起,生長時呈放射狀。除真...
脂質體介導DNA轉染技術分析2017/2/16
脂質體介導DNA轉染技術分析脂質體介導是目前條件下Z方便的轉染方法之一,適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,其轉染率高,優于磷酸鈣法,比它高5~100倍,能把DNA和RNA轉染到各種細胞株。用L...
胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒2017/2/14
胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒胰蛋白酶的作用是使細胞系間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為8.0、溫度為37...
SHG-44細胞的轉染操作方法2017/2/9
SHG-44細胞的轉染操作方法(1)轉染當天,加入脂質體/DNA混合物之前的短時間內,更換1ml新鮮的有血清或無血清培養基。(2)準備不同比例的DOSPER/DNA混合物,以確定每個細胞系的比例。①溶...
正常肺細胞培養操作方法2017/2/7
正常肺細胞培養操作方法取出小鼠細胞系正常肺組織,在預冷的PBS液中盡量除去氣管、支氣管、血管組織,將小鼠肺組織上面的血污用PBS清洗后,剪成1mm3小塊,用0.25%的胰酶溶液清洗一次,繼續用0.25...
細胞株免疫組化染色基本技術及注意事項2017/1/24
細胞株免疫組化染色基本技術及注意事項①根據課題的內容選用動物,選用配套的Ab。如Ab-I鼠抗人的抗體,細胞株與其他種屬間無交叉,則不能用其他動物,而且Ab-Ⅱ必須是羊抗鼠,若PAP法Ab-Ⅲ必須來源于...
原代細胞周期測定操作步驟2017/1/21
原代細胞周期測定操作步驟[實驗器材]1.儀器原代細胞倒置顯微鏡,CO2培養箱,普通冰箱,超凈工作臺,低速冷凍離心機,顯微數碼攝影系統.水浴鍋。2.材料與試劑(1)非無菌材料酒精棉球,離心管架,血細胞計...

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