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公司向您推薦小鼠神經星形膠質細胞的詳細說明:
產品名稱 | 小鼠神經星形膠質細胞 |
規格 | 5×105 |
貨號 | YS-X6520 |
產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。科技提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、科技售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞株的培養和傳代培養:
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養于含10%小牛血清和抗生素的培養液中,培養對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養,根據細胞生長特性,在適當的時候進行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代:
直接離心后吸去培養上清液,用新鮮培養液稀釋懸浮細胞,一般按1:2-1:5 稀釋細胞后,分瓶繼續培養。?
實驗操作步驟:
a.采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
HE 瓊脂培養基Hektoen Enteric Agar Medium敵稗標準溶液 10μg/ml,u=4%改良BPLS瓊脂pSELECT-NGFP-blasti
三糖鐵瓊脂培養基Triple Sugar-Iron-Agar Medium伏殺硫磷標準溶液 10μg/ml,u=7~3%,酮MIO培養基pSELECT-NHA-blasti
麥康凱瓊脂MacConkey Agar伏殺硫磷標準溶液 100μg/ml,u=7~3%,酮 XLT4瓊脂pSELECT-NHis-blasti
麥康凱肉湯MacConkey Broth克螨特 分析標準品,91%D/E中和肉湯pSELECT-NLucia-blasti
伊紅美藍瓊脂培養基Levine Eosin-Methylene Blue-Agar Medium克螨特標準溶液 100μg/ml,u=3%D/E中和瓊脂pSELECT-GFPzeo-LacZ
Baird-Parker 瓊脂培養基基礎Baird-Parker Agar Medium Base克螨特標準溶液 10μg/ml,u=4%M-肉湯pSELECT-GFPzeo-mcs
亞碲酸鉀卵黃增菌液標準溶液 100μg/ml,u=4%()煌綠黃胺嘧啶瓊脂pSELECT-hygro-LacZ
Vogel-Johnson 瓊脂基礎Vogel-Johnson Agar Medium Base標準溶液 10μg/ml,u=6%(劇LIM培養基pSELECT-hygro-mcs
1%亞碲酸鉀溶液1%sterile potassium lurite solution哌草磷 分析標準品,93%BETA-SSA瓊脂pSELECT-neo-LacZ
鹽胱氨酸培養基Fluid Selenite-Cystine Medium三氯殺蟲酯標準溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:異醇ITC肉湯pSELECT-neo-mcs
小鼠神經星形膠質細胞銪標準溶液 1000μg/ml CO2產氣袋 2.5L 嗜二氧化碳菌培養;適用于2.5L或7L密封培養罐大豆卵磷脂(磷脂酰膽堿)Mouse Txlna(Alpha-taxilin) ELISA Kit
Mouse DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA Kit
鉺標準溶液 1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO<sub>3</sub>2.5L密封培養罐 19.7×13.5×9.5cm;使用2.5L系列產氣袋1只,2.5升≤10皿酸氯倍他索Mouse Chia(Acidic mammalian chitinase) ELISA Kit
Mouse Chi3l4(Chitinase-3-like protein 4) ELISA Kit
鉺標準溶液 1000μg/mL,基體:10%HCL7.0L密封培養罐 28.0×21.3×11.2cm 使用2.5L系列產氣袋3只,7.0升≤30皿溶劑黃157Mouse Anpep(Aminopeptidase N) ELISA Kit
Mouse Ndnf(Protein NDNF) ELISA Kit
銪標準溶液 1000µg/mL in 10%HCL15×30cm培養袋 自帶密封壓槽,重復使用普侖司特Mouse Kap(Kidney androgen-regulated protein) ELISA Kit
Mouse IGFBP-7(Insulin-like growth factor-binding protein 7) ELISA Kit
醛標準溶液 1000μg/ml微需氧產氣袋 微需氧菌培養;適用于2.5L或7L密封培養罐
焦釩酸鈉Mouse Prnp(Major prion protein) ELISA Kit
Mouse Gypa(Glycophorin-A) ELISA Kit
氟離子(F-)標準溶液 1000μg/ml厭氧產氣袋 *厭氧菌培養;適用于15×30cm培養袋
碲化鉍Mouse Klk1b22(Kallikrein 1-related peptidase b22) ELISA Kit
Mouse Nfkb2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit
氟離子(F-)標準溶液 500mg/L,溶劑:水微需氧產氣袋 微需氧菌培養;適用于15×30cm培養袋
蟾蜍衣提取物Mouse B4galt1(Beta-1,4-galactosyltransferase 1) ELISA Kit
Mouse Crry(Complement regulatory protein Crry) ELISA Kit
氟離子(F-)標準溶液 1000mg/L,基體:水二氧化碳產氣袋 嗜二氧化碳菌培養;適用于15×30cm培養袋
二聚巰基酮Mouse Slco1a1(Solute carrier organic anion transporter family member 1A1) ELISA Kit
Mouse Acvr2a(Activin receptor type-2A) ELISA Kit
金標準溶液 1000μg/ml氧氣指示劑 厭氧培養監測;1只/次,可重復使用4-5次
Mouse DNA topoisomerase 1) ELISA Kit
Mouse Crk(Adapter molecule crk) ELISA Kit
金標準溶液100.0μg/g,基體:0.5mol/l鹽酸3.5L厭氧產氣袋 *厭氧菌培養;適用于7.0L密封培養罐胡椒醇Mouse Eef2(Elongation factor 2) ELISA Kit
Mouse MAOB(Amine oxidaseB) ELISA Kit
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
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