在elisa試劑盒批發中，進行各項試驗條件的選擇是很首要的，其間包括:
有條件者應運用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是如今較為滿意的供氫體。
底物作用一段時間后，應參與強酸或強堿以中止反應。
通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。
底物運用液有必要新鮮制造，尤其是H2O2在臨用前參與。
      然后再固定其它條件或采納“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗系統里地滴定其工作濃度。
有時本底較高，說明有非特異性反應，可選用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇懇求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。
     蛋白質包被的Z適濃度需進行滴定：即用不一樣的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相一起，查詢陽性標本的OD值。
選擇OD值Z大而蛋白量Z少的濃度。關于多數蛋白質來說通常為1～10μg/ml。