人正常組織細(xì)胞實(shí)驗(yàn)原理： 
兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并成一個(gè)雙核或多核細(xì)胞的現(xiàn)象稱為細(xì)胞融合，也稱細(xì)胞雜交，在自然情況下的受精過(guò)程即屬這種現(xiàn)象。 
誘導(dǎo)細(xì)胞融合的主要方法有：化學(xué)融合劑誘導(dǎo)融合和電融合。 
1. 病毒誘導(dǎo)融合：有許多種類的病毒能介導(dǎo)細(xì)胞融合，Z常用的是滅活的仙臺(tái)病毒（HVJ），為RNA病毒。病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過(guò)程有：首先是細(xì)胞表面吸附許多病毒粒子，接著細(xì)胞發(fā)生凝集，幾分鐘至幾十分鐘后，病毒粒子從細(xì)胞表面消失，而就在這個(gè)部位鄰接的細(xì)胞的細(xì)胞膜融合，胞漿相互交流，Z后形成融合細(xì)胞。 
2. 化學(xué)融合劑誘導(dǎo)融合：化學(xué)融合劑主要有脂肪酸衍生物、脂質(zhì)體、鈣離子、水溶性高分子化合物、水溶性蛋白質(zhì)和多肽，其中Z常用的是聚已二醇（PEG）。PEG用于細(xì)胞融合至少有兩方面的作用：①可促使細(xì)胞凝結(jié)；②破壞互相接觸處的細(xì)胞膜的磷脂雙分子層，從而使相互接觸的細(xì)胞膜之間發(fā)生融合，進(jìn)而細(xì)胞質(zhì)溝通，形成一個(gè)打的雙核或多核融合細(xì)胞。 
3. 電融合：是指細(xì)胞在電場(chǎng)中極化成偶極子，并沿著電力線排列成串，然后用高強(qiáng)度、短時(shí)程的電脈沖擊穿細(xì)胞膜而導(dǎo)致細(xì)胞融合。 
細(xì)胞融合技術(shù)在基因定位、基因表達(dá)產(chǎn)物、腫瘤診斷核治療、生物新品種培育及單克隆抗體技術(shù)等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用前景。單克隆抗體技術(shù)就是通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來(lái)的，在生命科學(xué)研究核應(yīng)用方面產(chǎn)生了重大影響。 

實(shí) 驗(yàn) 操 作 

1.在公雞翼下靜脈抽取2ml雞血，加入盛有8ml的Alsever液中，使血液與Alsever液的的比例達(dá)1∶4，混勻后可在冰箱中存放一周； 
2.取此儲(chǔ)存雞血0.2ml加入0.8ml的0.85％生理鹽水，充分混勻，1500r/min離心5min，棄去上清，加入1ml的0.85％生理鹽水，重復(fù)上述條件離心兩次。Z后棄去上清，加GKN液0.8ml，離心； 
3.棄去上清，加入0.3ml的GKN溶液，制成細(xì)胞懸液；（也可以用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，用GKN液將其調(diào)整為106個(gè)/ml）； 
4.取以上細(xì)胞懸液0.2ml放入1ml的EP管中，然后放入37℃水浴中預(yù)熱，同時(shí)將50％PEG液一并預(yù)熱20min； 
5.20min后將0.2ml的50％PEG溶液逐滴沿離心管壁加入到0.2ml細(xì)胞懸液中，邊加邊搖勻，然后放入37℃水浴中保溫20min； 
6.20min后，加入GKN溶液1ml，靜止于水浴中20min左右； 
7.1500r/min離心5min，棄去上清，加GKN溶液再離心1次； 
8.棄去上清，加入GKN液少許，混勻，取少量懸浮于載玻片上，加入詹納斯綠染液，用牙簽混勻，3min蓋上蓋玻片，觀察細(xì)胞融合情況。 
推薦：細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)相關(guān)實(shí)驗(yàn)溶液的配制
Alsever溶液：葡萄糖2.05g，檸檬酸鈉0.80g，NaCl 0.42g，溶于100ml雙蒸水中。
GKN溶液：NaCl 8g，KCl 0.4g，Na2HPO4·2H2O 1.77g，NaH2PO4·H2O 0.69g，葡萄糖2g，酚紅0.01g，溶于1000ml水中。
人正常組織細(xì)胞50％PEG溶液：稱取一定量的PEG（WM＝4000）放入燒杯中，沸水浴加熱，使之熔化，待冷卻至50℃時(shí)，加入等體積預(yù)熱至50℃的GKN溶液，混勻，置37備用。
巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基    英文名稱：    MaM    規(guī)格:    500 ml
黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基    英文名稱：    MelM    規(guī)格:    500 ml
黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基-2（不含TPA）    英文名稱：    MelM-2    規(guī)格:    500 ml
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基    英文名稱：    FM    規(guī)格:    500 ml
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2（用于心肌成纖維細(xì)胞）    英文名稱：    FM-2    規(guī)格:    500 ml
肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基    英文名稱：    AEpiCM    規(guī)格:    500 ml
骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基    英文名稱：    SkMCM    規(guī)格:    500 ml
上皮細(xì)胞培養(yǎng)基    英文名稱：    EpiCM    規(guī)格:    500 ml
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