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細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠皮下脂肪細胞說明 | T25m2 | CS-963927 |
大鼠皮下脂肪細胞【Rat Fat: Normal Subcutaneous Fat Cells】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2 培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2 培養細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
動物組織β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量檢測試劑盒20 乙酸鈣一水(>98%,BR) Calcium acetate, monohydrate 質量規格:>98%,BR
動物組織β-半乳糖苷酶活性高質敏感比色法定量檢測試劑盒20 三鈣(>98%,BR) Calcium phosphate, tribasic 質量規格:>98%,BR
動物組織冰凍切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(ALCIANBLUE)染色試劑盒50 DL-硒代蛋氨酸(USP) DL-Selenomine 質量規格:>98%(HPLC),USP
動物組織超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50 蜜二糖 Melibiose 質量規格:>98%,水合物
動物組織鈣ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 草酸鈉(>98%,BC) oxalate 質量規格:>98%,BC
動物組織鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 鎢酸鈉二水(>98%,BR) tungstate, dehydrate 質量規格:>98%,BR
動物組織高內質網分離試劑盒10 丁二酸酐(>98%,BR) Succinic anhydride 質量規格:>98%,BR
動物組織高質化肌質網分離試劑盒10 吐溫60 Tween-60 質量規格:BR
動物組織活性肌質網分離試劑盒10 酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC) Zymosan A from Saccharomyces cerevisiae 質量規格:>98% (HPLC),BC
動物組織活性內質網分離試劑盒10 硫酸鈣(>99%,BR) Calcium sulfate, anhydrous 質量規格:>99%,BR
動物組織氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發光法定量檢測試劑盒50 硫酸軟骨素 Chondroitin sulfate 質量規格:>95%,BR
ELISAKitADR兔阿霉素規格:48T/96T 異煙酸 Isonicotinic acid 質量規格:>98%,BR
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒 ,英文名: BSA ELISA Kit L-蘋果酸 L-Malic acid 質量規格:>98%,BR
人褪黑素(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMelatonin,MTELISAKit 96T/48T 蛋白酶K溶液(20 mg/ml) Proteinase K Solution, 20 mg/ml 質量規格:20 mg/ml
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)試劑盒 Rat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit 多聚賴氨酸0.1%溶液 Poly-L-lysine solution ( 0.1%) 質量規格:M.W:150,000~300,000
英文名稱HumanE-CadherinELISAKit人E-鈣粘附分子(E-Cadherin)規格:96T/48T 鹽酸四環素溶液,50 mg/ml Tetracycline solution, 50 mg/ml, sterile 質量規格:50 mg/ml,滅菌裝
動物組織總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 D-葡糖糖-6-二鈉二水 D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate 質量規格:>99%,BR
ELISAKitAβ1-40兔β淀粉樣蛋白1-40規格:48T/96T 丁二酸鈉(AR) succinate 質量規格:AR,>99%
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 牛血紅蛋白 Hemoglobin 質量規格:BR
Rat methylase ELISA Kit (Methylase) 大鼠化酶(Methylase)ELISA試劑盒 聚乙二醇10000 PEG 10000 質量規格:分子量9,000~11,000
大鼠皮下脂肪細胞說明地生蘭(terresial)移植維護培養基500毫升溶液/片劑 靈芝酸C甲酯 HPLC≥95% 20mg
地生蘭(terresial)增殖培養基500毫升溶液/片劑 靈芝酸C HPLC≥98% 10mg
電擊法酵母細胞轉化試劑盒20 靈芝酸C HPLC≥95% 20mg
電擊法細胞融合試劑盒10 靈芝酸C HPLC≥95% 20mg
電鏡檢測化學固著溶液10毫升 靈芝酸C HPLC≥95% 20mg
電鏡樣品固著液(2%Formalin固著液)50毫升 靈芝酸B HPLC≥98% 20mg
電鏡組織三固著液(2,4,6-imethylpyridinepuriss)50毫升 靈芝酸B HPLC≥97% 20mg
電轉感受態細菌制備試劑盒1 靈芝酸AM HPLC≥98% 20mg
電轉印DNA南方雜交試劑盒5 靈芝酸A(標準品) Ganoderic acid A 質量規格:HPLC≥95%,標準品
吊鐘海棠*培養基500毫升溶液/片劑 靈芝酸A HPLC≥98% 20mg
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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