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1X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml實驗方法

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更新時間:2017-07-07 13:05:10瀏覽次數:585次

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公司供應的1X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

1X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
1X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
1X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2

表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CEACAM1 Others Rat 大鼠 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液 (陽性對照)

VE細胞,人血管內皮細胞 小鼠骨髓瘤細胞,NS-1細胞 人臍靜脈內皮細胞cDNAHUVEC cDNA

小鼠胰腺癌細胞(B);Pan02

DU 145(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0230Tca-8113(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 敘利亞倉鼠細胞系;Syrian Hamster AV12
恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]

F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人細胞裂解液 (陽性對照)

HL-60 人原髓細胞白血病細胞

COLO 320DM 人結直腸腺癌細胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白

大鼠周神經成纖維細胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人子宮內膜癌細胞系 Human
人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 )

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2

CL-0366IAR20(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2

人肺癌細胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細胞*培養基 100mL

EL4.IL-2 小鼠淋巴瘤細胞

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人突觸回蛋白2(SYNJ2)免疫試劑盒 Human Synaptojanin 2,SYNJ2 ELISA Kit

海藻糖酶測試盒 可見分光光度法 25/24

Ratsolubleinterleukin-1receptor,IL-1sRELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sR)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanIPO-38ELISA試劑盒人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規格:96T/48T

HumanNa+/H+exchanger3,NHE3ELISAKitNa+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子*酯轉移蛋白(CETP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiotensin I receptor antibody (ANG- I R) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-R)ELISA試劑盒

Humananti-braintissueantibody,ABAbELISAKit 人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanEpithelialmembraneantigen,EMAELISA試劑盒人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織PYK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanoxytocinOISAKit人催產素(OT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
1X PBS緩沖液 (pH7.4)500ml實驗方法人白喉抗體(DiphtheriaAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白C抗原(DR15ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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