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DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書

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更新時間:2017-07-10 09:11:30瀏覽次數(shù):550次

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DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
SUP-B15(Ph+急淋白血病細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2

兔脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells

APCS Others Human Serum amyloid P component / APCS / SAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

BE(2)-M17細(xì)胞,人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 寄生曲霉 293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA

人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3

Hepa 1-6(小鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]
人氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHTSMC cDNA

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

VSMC細(xì)胞,大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞 786-0(腎透明細(xì)胞腺癌) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16
CAMK1G Others Human CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人氣管平滑肌細(xì)胞RNAHTSMC miRNA5 μg

小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk

Caco-2細(xì)胞,結(jié)腸腺癌細(xì)胞 鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株,L-M TK細(xì)胞 人細(xì)胞;Hela P10s-11F

615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS

IL13RA1 Others Mouse 小鼠 IL13Ra1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 ,英文名: Aβ1-40 ELISA Kit

人套膜蛋白(iNV)ELISA檢測試劑盒HumanInvolucrin,iNVELISAKit 96T/48T

大鼠*原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒 Rat prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit

英文名稱RatThyroglobulinELISAKit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

酵母二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitHAase人透明質(zhì)酸酶規(guī)格:48T/96T
兔子D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human hemagglutinin (HA) ELISA Kit 人血凝素(HA)ELISA試劑盒

Humanthyroidhormoneautoantibodies,THAAELISAKit 人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanferritin,FEELISA試劑盒人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織WNV(WESTNILE)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20

HumanN-terminalprocollagenpropeptidePNPELISAKit人Ⅲ型前膠原肽(PNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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