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硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
磷酸鈣細胞轉染試劑盒400T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
磷酸鈣細胞轉染試劑盒400T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
QSG-7701(人正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2
原代上皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
BST2 Others Human 人 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照)
HUVE-12/CRL2480細胞,人臍靜脈內皮細胞 長臂猿淋巴瘤,MLA-144細胞 人真皮淋巴內皮細胞總RNAHDLEC tRNA
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3
EL4(小鼠淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎細胞;104C1
CL-0162MS1(小鼠胰島內皮細胞)5×106cells/瓶×2
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-裂解物HCM-a L
家豬皮膚細胞;SSC-S1 癌細胞,ZR-75-1細胞 NS1細胞,小鼠骨髓瘤細胞
腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]
小鼠皮層神經膠質細胞(EGFP標記)
3T6細胞,小鼠胚胎成纖維細胞 人前列腺癌細胞,gpc-1細胞 人視網膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg
恒河猴腎細胞;RM-3
EPCAM Others Human 人 EpCAM 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人透明質酸蛋白聚糖連結蛋白1(HAPLN1)免疫試劑盒 Human HAPLN1 ELISA Kit
*脫氫酶測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratsolubleinterleukin-2receptor,IL-2sRαELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISA試劑盒人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒
Humananti-parotidductantibodyELISAKit 人抗腮腺管抗體(anti-parotidductAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanepstein-barrvirusIgA,EBvIgAELISA試劑盒人EB病毒IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織ROCK-I激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanovariancancermarker-CA125ELISAKit人卵巢癌標志物CA125ELISA試劑盒規格:96T/48T
磷酸鈣細胞轉染試劑盒400T免費代測人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人ω干擾素(IFN-ω)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人γ谷酰轉移酶(GGT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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