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硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2
胎兒骨髓間質干細胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells
CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人細胞裂解液 (陽性對照)
SHG-44細胞,神經膠質瘤細胞 霉 人淋巴內皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2B
HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;LLC-MK2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2
ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人骨髓間充質干細胞(hMSCs) 人肝癌細胞,Hep G2細胞 C127(細胞)
人癌細胞;MDA-MB-157
BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人細胞裂解液 (陽性對照)
MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈平滑肌細胞總RNAHUASMC tRNA
人腹膜毛細血管內皮細胞*培養基 100mL
PA317細胞,逆轉錄病毒包裝的NIH3T3細胞 A10(大鼠主動脈血管平滑肌細胞) 小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14
CSF2 Protein Human 重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)
TE-1(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠原B細胞株;BaF3
小鼠α-骨膠原交聯(αCTx)ELISA試劑盒 ,英文名: αCTx ELISA Kit
人鐵蛋白(FE)ELISA檢測試劑盒Humanferritin,FEELISAKit 96T/48T
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)免疫試劑盒 Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit
英文名稱RatCXCL2/MIP-2ELISAKit大鼠CXCL2/MIP-2規格:96T/48T
考馬斯亮藍細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒500次
ELISAKitGKRP人葡萄糖激酶調節蛋白規格:48T/96T
兔子白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 人血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒
HumanSolubleClusterofdifferentiation38,sCD38ELISAKit 人可溶性白細胞分化抗原38(sCD38)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人雌激素誘導蛋白PS2ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織SYK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanOrexinB,OX-BELISAKit人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Earle's*(1×EBSS,含鈣鎂糖酚紅)500ml使用說明書人TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人TATA盒結合蛋白/TBP相關因子(TAF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人S蛋白100P(S-100P)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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