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Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)500ml實驗方法

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更新時間:2017-07-10 09:07:53瀏覽次數(shù):332次

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Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)500ml實驗方法SF17(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

狗骨髓間質干細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

U87MG細胞,人惡性膠質母細胞瘤細胞 雜色曲霉 人氣管上皮細胞RNAHTEpiC miRNA5 μg

人肺鱗癌細胞;NCI-H520

HCCC-9810(人肝內膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0393NCI-H209(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細胞;VERO

Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)500ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)500ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)500ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
人絨毛間葉成纖維細胞總RNAHVMF tRNA

EREG Others Human Epiregulin / EREG 人細胞裂解液 (陽性對照)

Eca-109 人食管癌細胞

CL-0393NCI-H209(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

MA, 小鼠星形膠質細胞

人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5538LC 人肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
F9 Others Human F9 / FIX / Factor IX 人細胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC

NCI-H520 肺鱗癌

正常細胞

小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記)

人正常肺上皮細胞;BEAS-2B 人淋巴內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠成纖維細胞生長因子12(FGF12)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF12 ELISA Kit

人天青殺素(AZU)ELISA檢測試劑盒Humanazurocidin,AZUELISAKit 96T/48T

大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)免疫試劑盒 Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA Kit

英文名稱RatTestoteroneELISAKit大鼠睪同(Testoterone)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

酵母細胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10

ELISAKitDAF/CD55人衰變加速因子規(guī)格:48T/96T
兔子白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 人血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒

HumanpodocinELISAKit PodocinELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanEukaryotictranslationinitiationfactor3a,eIF3aELISA試劑盒人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織TAK1-TAB1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相關蛋白(OPAs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Earle's*(1×EBSS,無鈣鎂糖酚紅)500ml實驗方法Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

p物質(SP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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