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細胞凍存用DMSO(無菌)50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-10 09:09:53瀏覽次數:439次

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公司供應的細胞凍存用DMSO(無菌)50ml實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

細胞凍存用DMSO(無菌)50ml實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞凍存用DMSO(無菌)50ml實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞凍存用DMSO(無菌)50ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

Balb/c小鼠骨髓間質干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells

KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照)

H4細胞,人腦神經膠質瘤細胞(H4) 腸炎沙門氏菌 人心臟成纖維細胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg

人髓母細胞瘤細胞;D341Med

HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 獼猴皮膚細胞;MMS7
GBC-SD, 人膽囊癌細胞

ERBB4 Others Human / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腦動脈血管內皮細胞*培養基 100mL

Hs 746T人胃癌細胞 Hs human gastric cancer cells 746T DMEM+10% FBS

IFNA10 Protein Human 重組人 Interferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 標簽)

MDA-MB-415(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NRK(大鼠腎細胞)
小鼠腎臟上皮細胞(MREpiC)(5×105)

人臍靜脈內皮細胞cDNAHUVEC cDNA

大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J

雜交瘤(B);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網膜神經節細胞*培養基 100mL

HUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系 Human

TNFRSF11B Others Human TNFRSF11B / OCIF 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠基質金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP3 ELISA Kit

人天*氨基轉移酶(AST)ELISA檢測試劑盒HumanAspartateaminotransferase,ASISAKit 96T/48T

大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒 Rat plasminogen activator inhibitor ,PAI ELISA Kit

英文名稱RatangiotensinogenELISAKit大鼠血管緊張素原(aGT)規格:96T/48T

果菜抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20

ELISAKitFA人*規格:48T/96T
兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human hemoglobin C (HbC) ELISA Kit 人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒

HumanInhibin,INHELISAKit 人抑制素(INH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanfactorB,BFELISA試劑盒人B因子(BF)ELISA試劑盒規格:96T/48T

組織TRKB激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

HumanOncogeneProteinp190/bcr-ablELISAKitHumanOncogeneProteinp190/bcr-ablELISAKit人癌基因蛋白質p190/bcr-ablELISA試劑盒規格:96T/48T
細胞凍存用DMSO(無菌)50ml實驗方法NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

NK細胞ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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