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綠如藍染料,PCR 級1mL運輸

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更新時間:2017-07-17 13:04:58瀏覽次數:143次

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綠如藍染料,PCR 級1mL運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

綠如藍染料,PCR 1mL運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
綠如藍染料,PCR 1mL運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
綠如藍染料,PCR 1mL運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
綠如藍染料,PCR 1mL運輸詳細說明書:

15-keto Prostaglandin E2 500 ug     915-dioxo-11α-hydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid 15-keto PGE2 15-keto Prostaglandin E2

Ritalinic Acid 5 mg     α-

過濾水(500ML     Purified Water 18 mega-ohm purified water. Cell culture tested. Sterile Filtered

4Z),7Z),10Z-Tridecatrienoic Acid-d5 500 ug     4Z7Z10Z-trideca-4710-trienoic-1212’,131313-d5 acid 4Z),7Z),10Z-Tridecatrienoic Acid-d5

S-nitnoso-L-glutathione 5 mg     N-N-L-gamma-glutamyl-S-nitnoso-L-cysteinyl-glycine GSNO S-nitnoso-L-glutathione

Methyl -5-((2-t-butylcarbamothioylhydrazonomethyl-1-24-difluorophenyl-1H-pyrazole-4-carboxylate     CID 2745687
PtdIns-345-P3 12-dipalmitoyl sodium salt 500 ug     1-12R-dihexadecanoylphosphatidylinositol-345-trisphosphate tetrasodium salt Phosphatidylinositol-345-triphosphate C-16|DPPI-345-P3 PtdIns-345-P3 12-dipalmitoyl sodium salt

TAK-632 10 mg     N-[5-[[7-cyano-2-[cyclopropylcarbonylamino]-6-benzothiazolyl]oxy]-2-fluorophenyl]-3-trifluoromethyl-benzeneacetamide

CP 80633 1 mg     5-[3-[1S2S4R-bicyclo[221]hept-2-yloxy]-methoxyphenyl]tetrahydro-2-1H-pyrimidinone CP 80633

BAY-11-7085 5 mg     3-[[4-1,1-dimethylethylphenyl]sulfonyl]-2E-propenenitnile

Fast Green FCF 25 g     N-ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[3-sulfophenylmethyl]amino]phenyl]4-hydroxy-2-sulfophenylmethylene]-25-cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfo-benzenemethanaminium disodium salt NSC 379443 Fast Green FCF

DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (15 ml) MWCO 12-14 kDa
13R-HODE cholesteryl ester 25 ug     13R-xy7noxy-9Z11E-octadecadienoic acid cholesteryl ester 13R-HODE cholesteryl ester

LAQ824 10 mg     Dacinostat|NVP-LAQ824 2E-N-xy7noxy-3-[4-[[2-xy7noxyetxyl[2-1H-indol-3-yletxyl]amino]metxyl]pxenyl]-2-propenamide

Cal-520 鈉鹽     Cal-520 wo7ium salt

Levetiracetam 10 mg     (αS-etxyl-2-oxo-1-pyrrolidineacetamide UCB-L 059|Kea Levetiracetam

Dihomo-γ-Linolenic Acid etxyl ester 50 mg     8Z11Z14Z-eicosatrienoic acid etxyl ester etxyl DGLA Dihomo-γ-Linolenic Acid etxyl ester

3-Decanone 5-xy7noxy-1-4-xy7noxy-3-metxoxypxenyl- 5S- 5-xy7noxy-1-4-xy7noxy-3-metxoxypxenyl-3-decanone     6-Gingerol
TrypticaseSoySheepBloodAgarBase

乳糖復發酵培養基 Lactose Broth 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)

MUG培養基 MUG Medium 100 用于大腸桿菌測定

牛心湯瓊脂250g/瓶用于綿羊*制備incubationmedia牛心湯瓊脂250g/瓶用于綿羊*制備

大腸桿菌O157檢驗培養基
ThioglycollateMedium(withoutAgar)

布氏肉湯 250(g) incubation media 布氏肉湯 250(g)

察氏蛋白胨培養基 Czapek Dox Peptone Agar 250 酵母菌的培養

四號瓊脂基礎250用于霍亂弧菌選擇性分離培養,滅菌冷至50℃加入亞碲酸鉀,倒平板incubationmedia四號瓊脂基礎250用于霍亂弧菌選擇性分離培養,滅菌冷至50℃加入亞碲酸鉀,倒平板

碘液 2ml*20 每支添加于100mlHB4086
綠如藍染料,PCR 1mL運輸Nitrogen-fixingbacteriawiththeASugai’smedium

Baird-Parker瓊脂基礎 與卵黃亞碲酸鹽增菌液合用,用于*選擇性培養 500g incubation media Baird-Parker瓊脂基礎 與卵黃亞碲酸鹽增菌液合用,用于*選擇性培養 500g

發酵纖維單胞菌 produces isoprene /

PALCAMAgar

Sabouraud'sAgarModified

綠如藍染料,PCR 1mL運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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