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古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存

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更新時間:2017-07-18 12:18:20瀏覽次數:479次

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古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

 

古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
Prostaglandin F2α 50 mg     9α,11α,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; Dinoprost|PGF2α; Prostaglandin F2α

Cefoxitin sodium salt 250 mg     Betacef|Cenomycin|Farmoxin|Mefoxin|Merxin; 6R,7S-3-[[aminocarbonyloxy]methyl]-7-methoxy-8-oxo-7-[2-thienylacetylamino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid, monosodium salt

L-*(25GM     L-Cystine 56-89-3 MW 236.15; 99%

Clenbuterol hydrochloride 50 mg     4-amino-35-dichloro-α-[[11-dimethylethylamino]methyl]-benzenemethanol, monohydrochloride; NAB 365|Ventipulmin; Clenbuterol hydrochloride

7Z-Tricosene 5 mg     7Z-tricosene; 7Z-Tricosene

Spleen Tyrosine Kinase Inhibitor     Syk Inhibitor
TBS-Corey Lactone Aldehyde 5 g     [3aR-3aa,4a5b,6aa]-5-tert-butyl-dimethylsilylhexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde; TBS-Corey Lactone Aldehyde

*標記二甲基化組蛋白H3K27多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K27 Peptide 200 ul

FTY720 phenoxy-biotin 5 mg     2-amino-2-[2-4-octylphenylethyl]-1,3-propanediol-N-biotinoyl-1,5-diampentane FTY720 phenoxy-biotin

3,4-EDMA hydrochloride 50 mg     3,4-Ethylenedioxy-N-methylamphetamine; 1-2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride

LE 135 1 mg     4-7,8,910-tetrahydro-5,7,710,10-pentamethyl-5H-benzo[e]naphtho[2,3-b][1,4]diazepin-13-yl-benzoic acid LE 135

PtdIns--4)-P1 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt) (5 mg)     DHPI-4-P1|Phosphatidylinositol-4-phosphate C-6, PtdIns--4)-P1 -1,2-dihexanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, disodium salt
Prostaglandin E2 Express EIA Monoclonal Antibody 100 dtn     PGE2 EIA Express Antiserum; Prostaglandin E2 Express EIA Monoclonal Antibody

5-Azidopentanoic Acid 500 mg     5-Azidovaleric acid|Click Tag

Texas Red疊氮化物     Texas Red azide

R-Butaprost 10 mg     9-oxo-11alpha。,16R-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, metxyl ester; 15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester|TR 4978|(±)-15-deoxy-16R-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1 metxyl ester; R-Butaprost

Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide 25 mg     N-2-chloroetxyl-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACEA|2-chloro-AEA Arachidonoyl 2-Chloroetxylamide

N-1-((cyanometxylcarbamoylcyclohexyl-4-4-propylpiperazin-1-ylbenzamide; AAE581     Balicatib
匹克氏肉湯基礎B250g用于溶血性鏈球菌選擇性增菌培養。

亞鹽-多粘菌素-*瓊脂基礎 Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base 用于產氣莢膜梭菌的平板計數(GB標準)

LST肉湯 LST Broth 250 各種食品中大腸菌群近似值(MPN)測定

營養瓊脂(NA)細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代用(GB標準)incubationmedia營養瓊脂(NA)細菌計數、不含糖,可作血瓊脂基礎和傳代用(GB標準)

*鹽瓊脂 250g 用于*
Brain-HeartBaptistextractionliquidmedium

雙料乳糖膽鹽(含中和劑)培養基 Double Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標準)

SE增菌液 Selenite Enrichment Medium 250 增殖標本中的沙門氏菌

亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎中incubationmedia亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎中

WSSalmonellaAgar
古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存哥倫比亞瓊脂培養基2406g滅菌后冷至45℃左右時加入5%脫纖維羊血,用于空腸彎曲菌的培養。(CP、GB、EP、USP)

4651 CM 軟骨細胞培養基 500 ml incubation media 4651 CM 軟骨細胞培養基 500 ml

紫晶口磨 提高酒的含酯量,生香味 /

BETA-SSA瓊脂250g用于鏈球菌的選擇性分離培養

Cary-Blair氏*(不含瓊脂) 250g 用于運送腸道致病菌。

古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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