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dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存

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更新時間:2017-07-17 13:10:14瀏覽次數:236次

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dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存詳細說明書:

dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
15R-15-methyl Prostaglandin E2 10 mg     9-oxo-11alpha。,15R-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid Arbaprostil|15R-15-methyl PGE2 15R-15-methyl Prostaglandin E2

BCECF-Acetoxymethyl ester 25 mg     BCECF-AM 3,6-bisacetyloxy-5or 6-[[acetyloxymethoxy]carbonyl]-3-oxo-spiro[isobenzofuran-13H,9-[9H]xanthene]-2,7-dipropanoic acid, 2,7-bis[acetyloxymethyl] ester

維生素B6(鹽酸吡哆醇)(25GM     Pyridoxine HCl 58-56-0 98%

N-methyl-2-AI hydrochloride 10 mg     23-dihydro-N-methyl-1H-inden-2-amine monohydrochloride NM-2AI|N-methyl-2-Aminoindane N-methyl-2-AI hydrochloride

SNAP 50 mg     N-acetyloxy-3-nitnosothiovaline S-nitnoso-N-Acetyl-DL-Penicillamine SNAP

2-Methyl-4-(((4-methyl-2-4-trifluoromethylphenyl-13-thiazol-5-ylmethylsulfanylphenoxyacetic acid     GW501516
PtdIns-3-P1 12-dipalmitoyl ammonium salt 1 mg     1-12-dihexadecanoylphosphatidylinositol-3-phosphate diammonium salt DPPI-3-P1 PtdIns-3-P1 12-dipalmitoyl ammonium salt

1-methyl-D-Tryptophan 250 mg     1-methyl-D-tryptophan

17S-HpDoHE 25 ug     17S-hydroperoxy-4E7Z10Z13Z15Z19Z-docosahexaenoic acid 17S-hydroperoxy Docosahexaenoic Acid 17S-HpDoHE

3-oxo Stearic Acid 100 ug     3-oxo Octadecanoic Acid|β-keto Stearic Acid 3-oxo-octadecanoic acid

S3I-201 50 mg     2-hydroxy-4-[[2-[[4-methylphenylsulfonyl]oxy]acetyl]amino]-benzoic acid NSC 74859 S3I-201

DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 1 kDa     DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 1 kDa
13S-HODE 1 mg     13S-xy7noxy-9Z11E-octadecadienoic acid 13S-HODE

Darapladib 1 mg     SB 480848 N-[2-dietxylaminoetxyl]-2-[[4-fluoropxenylmetxyl]thio]-4,5,6,7-tetraxy7no-4-oxo-N-[[4-trifluorometxyl[1,1-bipxenyl]-4-yl]metxyl]-1H-cyclopentapyrimidine-1-acetamide

鬼筆環肽-AMCA偶聯物     Phalloidin-AMCA Conjugate

Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate 10 mg     dibutyl 3-xy7noxybutyl esterdibutyl 3-xy7noxybutyl ester-phosphoric acid TBP-OH Dibutyl-3-xy7noxybutyl Phosphate

Elaidic Acid 100 mg     9E-octadecenoic acid trans-Oleic Acid Elaidic Acid

3β,14-Dixy7noxy-5β,2022-bufadienolide 5β,2022-Bufadienolide-3β,14-diol     Bufalin
ITCBroth

乳糖肉湯 Lactose Broth 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌

蛋黃粉 Egg yolk powder 250 BR

BLB培養基250g/瓶用于雙歧桿菌的分離培養incubationmediaBLB培養基250g/瓶用于雙歧桿菌的分離培養

EEM培養基 250g 用于致病性大腸桿菌的增菌培養和腸桿菌的增菌培養
阪崎腸桿菌顯色培養基CRM006l供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計數

Agar 瓊脂粉 Japan 500g incubation media Agar 瓊脂粉 Japan 500g

亮白曲霉 高溫產脂酵母 /

四硫磺酸鹽煌綠增菌液(TTB肉湯)20/包用于沙門氏菌選擇性增菌培養

胰酪胨大豆瓊脂培養基(TSA) 250g 用于藥品抑菌劑效力檢測中細菌檢測
dNTP 溶液,100mM 0.5mL保存AgarmediumO(Baird-Parkeragar)

BAIRD-PARKER 貝爾德-帕克瓊脂/葡萄狀球菌選擇培養基 incubation media BAIRD-PARKER 貝爾德-帕克瓊脂/葡萄狀球菌選擇培養基

溴化十六烷基*銨瓊脂培養基 250g 用于綠膿桿菌及其它革蘭氏陰性非發酵菌的選擇性分離培養。(《中華人民共和國藥典》2010年版)

亞碲酸鉀血瓊脂基礎PotassiumluriteBloodAgarBase用于白喉桿菌的分離培養

雙歧桿菌瓊脂培養基 250g 用于雙歧桿菌的分

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