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dTTP 溶液,100mM0.5mL保存

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更新時間:2017-07-17 13:13:51瀏覽次數:180次

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dTTP 溶液,100mM0.5mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

dTTP 溶液,100mM0.5mL保存產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
dTTP 溶液,100mM0.5mL保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
dTTP 溶液,100mM0.5mL保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
dTTP 溶液,100mM0.5mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
1616-dimethyl Prostaglandin E2 10 mg     9-oxo-11alpha。,15R-dihydroxy-1616-dimethyl-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid 1616-dimethyl PGE2 1616-dimethyl Prostaglandin E2

CID-755673 25 mg     2,3,4,5-tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2,3-c]azepin-1-one

*(500GM     Sodium Bienponete Endotoxin and cell culture tested.

L-+-Ergothioneine 10 mg     αS-carboxy-23-dihydro-NNN-trimethyl-2-thioxo-inner salt-1H-imidazole-4-ethanaminium 2-Mercaotohistidine betaine|NSC 7175 L-+-Ergothioneine

SE 175 50 mg     2-[[4-[nitnooxymethyl]benzoyl]thio]-benzoic acid methyl ester SE 175

N-[3-1H-Benzimidazol-2-yl-4-chlorophenyl]-345-triethoxybenzamide     SANT-2
PtdIns-45-P2 12-dipalmitoyl ammonium salt 1 mg     1-12R-dihexadecanoylphosphatidylinositol-45-bisphosphate triammonium salt Phosphatidylinositol-45-diphosphate C-16|DPPI-45-P2 PtdIns-45-P2 12-dipalmitoyl ammonium salt

Peptide YY 3-36 500 ug     Pancreatic Peptide YY|Peptide Tyrosine Tyrosine

NSC 23766 hydrochloride 10 mg     N6-[2-[[4-diethylamino-1-methylbutyl]amino]-6-methyl-4-pyrimidinyl]-2-methyl-46-diamine trihydrochloride NSC 23766 hydrochloride

TBCA 5 mg     Casein Kinase II Inhibitor III|Tetrabromocinnamic Acid 2E-3-2,3,4,5-tetrabromophenyl-2-propenoic acid

RCS-4 4-hydroxyphenyl metabolite 10 mg     4-hydroxyphenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-ylmethanone RCS-4 4-hydroxyphenyl metabolite

DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 1 kDa     DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 1 kDa
13-OxoODE 50 ug     13-oxo-9Z11E-octadecadienoic acid 13-KODE 13-OxoODE

Nullscript 1 mg     N-xy7noxy-1,3-dioxo-1H-benz[de]isoinoneoline-23H-but*

鬼筆環肽-iFluor 532偶聯物     Phalloidin-iFluor 532 Conjugate

Eicosapentaenoyl Ethanolamide-d4 1 mg     N-2-xy7noxyetxyl-11’,22-d4-5Z8Z11Z14Z17Z-eicosapentaenamide EPEA-d4 Eicosapentaenoyl Ethanolamide-d4

Olvanil 10 mg     N-[4-xy7noxy-3-metxoxypxenylmetxyl]-9Z-octadecenamide N-Vanillyloleamide|NE 1955Olvanil

2E     ML243
亞鉍瓊脂(BS)23060250g用于腸道致病菌特別是沙門氏菌和志賀氏菌的選擇性分離培養(GB/T4789.28-20034.20GB/T4789....

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