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dNTP 和引物清除劑100 次運輸

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更新時間:2017-07-17 13:17:34瀏覽次數:179次

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dNTP 和引物清除劑100 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

dNTP 和引物清除劑100 次運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
dNTP 和引物清除劑100 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
dNTP 和引物清除劑100 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
dNTP 和引物清除劑100 次運輸詳細說明書:

dNTP 和引物清除劑100 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Sulprostone 500 ug     N-methylsulfonyl-9-oxo-11alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17181920-tetranor-prosta-5Z13E-dien-1-amide Sulprostone

5-Cyano-2,3-di-p-tolyltetrazolium chloride 100 mg     CTC|Cyanotolyl Tetrazolium Chloride 5-cyano-2,3-bis4-methylphenyl-2H-tetrazolium, monochloride

二水鉬酸鈉(500GM     Sodium MolybdateVI), Dihydrate 10102-40-6 MW 241.95 ACS

Meloxicam 500 mg     4-hydroxy-2-methyl-N-5-methyl-2-thiazolyl-11-dioxide-2H-12-benzothi-3-carboxamide Coxicam|UH-AC 62XX Meloxicam

DAN-1 EE hydrochloride 5 mg     4-[[3-amino-2-naphthalenylamino]methyl]-benzoic acid ethyl ester monohydrochloride DAN-1 EE hydrochloride

4-1133-Tetramethylbutylphenyl-polyethylene glycol t-Octylphenoxypolyethoxyethanol Polyethylene glycol tert-octylphenyl etxen     Triton X-100 MegaPure Detergent 10% Solution
Xestospongin C 50 ug     [1R-1R4aR11R12aS13S16aS23R24aS]-eicosahydro-5H17H-123:1113-diethano-2H14H-[111]dioxacycloeicosino[23-b:1213-b1]dipyridine XeC|Araguspongine E Xestospongin C

Streptavidin:SureLight APC 1 mg     Streptavidin:SureLight APC

PP2 1 mg     3-4-chlorophenyl-1-11-dimethylethyl-1H-pyrazolo[34-d]pyrimidin-4-amine AGL 1879 PP2

W-15 5 mg     4-chloro-N-[1-2-phenylethyl-2-piperidinylidene]-benzenesulfonamide

JWH 081 N-4-hydroxypentyl metabolite 5 mg     1-4-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl)(4-methoxynaphthalen-1-ylmethanone JWH 081 N-4-hydroxypentyl metabolite

DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 12-14 kDa
ω-3 Arachidonic Acid-d8 1 mg     8Z11Z14Z17Z-eicosatetraenoic-89111214151718-d8 acid ω-3 AA-d8 ω-3 Arachidonic Acid-d8

4-Chlorometxcathinone xy7nochloride 5 mg     4-CMC|Clephedrone 1-

鬼筆環肽-iFluor 750偶聯物     Phalloidin-iFluor 750 Conjugate

α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 1 mg     N-2-xy7noxyetxyl-11’,22-d4-octadeca-9Z12Z15Z-trienamide α-Linolenoyl Ethanolamide-d4

Oleoyl Ethanolamide 50 mg     N-2-xy7noxyetxyl-9Z-octadecenamide OEA|Oleic Acid Ethanolamide Oleoyl Ethanolamide

3R5aS6R8aS9R12S12aR-Octaxy7no-369-trimetxyl-312-epoxy-12H-pyrano[43-j]-12-benzodioxepin-103H-one     Artemisinin
肉湯培養基D250g用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌培養

沙門氏菌顯色培養基B 25000 mL/ incubation media 沙門氏菌顯色培養基B 25000 mL/

半固體瓊脂 250g 供細菌動力觀察、菌種保存等用(GB 4789.4-2010GB/T4789.8-2008)

RV肉湯RappaportVassiliadisSalmonellaenrichmentbroth用于沙門氏菌選擇性增菌培養。

TPY瓊脂培養基 250g 用于雙岐桿菌分離培養(GB標準)
MycoplasmaAgarBase

Candida Elective瓊脂 250(g) incubation media Candida Elective瓊脂 250(g)

亮綠乳糖培養液(BGB) 250g 用于多管發酵法測定飲用礦泉水中大腸菌群的確證試驗(GB/T8538-2008)

梭菌*ClostridiumenrichmentMedium用于梭菌增菌培養

乳糖亞鹽培養基(LS) 250g 用于產氣莢膜梭菌確認試驗
dNTP 和引物清除劑100 次運輸瓊脂培養基N250g于綠膿假單胞菌的分離培養。

Azide dextrose broth 疊氮葡萄糖肉湯 1.01590.0500 MERCK默克 incubation media Azide dextrose broth 疊氮葡萄糖肉湯 1.01590.0500 MERCK默克

金氏B培養基 250g 用于飲用天然礦泉水中銅綠假單胞菌產熒光特性的測定。(GB/T 8538-2008)

尿素卵黃雙糖培養基Urea-EggYolkdoublesugarMedium用于白喉桿菌的鑒別試驗

*鋰鹽 5mg

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