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古細菌 + 真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
PCR Mix 染料10mL保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
PCR Mix 染料10mL保存產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
PCR Mix 染料10mL保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
PCR Mix 染料10mL保存詳細說明書:
Sulprostone (1 mg) N-(methylsulfonyl)-9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; Sulprostone
5-Cyano-2,3-di-(p-tolyl)tetrazolium (chloride) (25 mg) CTC|Cyanotolyl Tetrazolium Chloride; 5-cyano-2,3-bis(4-methylphenyl)-2H-tetrazolium, monochloride
無水*(100GM) Sodium Phosphate, Dibasic, Anhydrous, ACS Grade; Cas 7558-79-4; Formula: Na2HPO4; Formula Weight: 141.96
MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC (1 mg) N-(4-methoxy-1,4-dioxobutyl)-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-(4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl)-L-valinamide; I 1270|MeOSuc-AAPV-AMC|Methoxy Succinyl-Ala-Ala-Pro-Val-AMC; MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC
DAN-1 EE (hydrochloride) (50 mg) 4-[[(3-amino-2-naphthalenyl)amino]methyl]-benzoic acid, ethyl ester, monohydrochloride; DAN-1 EE (hydrochloride)
4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenyl-polyethylene glycol, t-Octylphenoxypolyethoxyethanol, Polyethylene glycol tert-octylphenyl ether Triton X-100, MegaPure Detergent, 10% Solution
2-APB (1 g) 2,2-diphenyl-1,3,2-oxaza-borolidine internal salt; 2-APB
Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format (1 mg) Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format
PP2 (10 mg) 3-(4-chlorophenyl)-1-(1,1-dimethylethyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine; AGL 1879; PP2
Pyrazolam (1 mg) 8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepine
8-iso Prostaglandin E2 isopropyl ester (100 ug) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-(8。beta。)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, isopropyl ester; 8-iso PGE2 isopropyl ester; 8-iso Prostaglandin E2 isopropyl ester
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 12-14 kDa DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 12-14 kDa
ω-3 Arachidonic Acid-d8 (10 mg) 8Z,11Z,14Z,17Z-eicosatetraenoic-8,9,11,12,14,15,17,18-d8 acid; ω-3 AA-d8; ω-3 Arachidonic Acid-d8
4-Chlorometxcathinone (xy7nochloride) (50 mg) 4-CMC|Clephedrone; 1-
鬼筆環肽-iFluor 780偶聯物 Phalloidin-iFluor 780 Conjugate
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 (100 ug) N-(2-xy7noxyetxyl-1,1’,2,2’-d4)-octadeca-9Z,12Z,15Z-trienamide; α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
N-Oleoyl Glycine (10 mg) N-(9Z-octadecenoyl)-glycine; N-Oleoyl Glycine
Berbenine Berbamine dixy7nochloride
LBSagar
沙門氏志賀氏增菌液 Salmonella Shigiella Enrichment 用于志賀氏菌和沙門氏菌增菌培養
豆蛋白質 Soy protein isolate 250克 BR,90%
厭氧菌瓊脂250g/瓶用于厭氧菌的分離培養incubationmedia厭氧菌瓊脂250g/瓶用于厭氧菌的分離培養
VRB-MUG瓊脂 100g 用于大腸桿菌的固體平板檢測(GB標準)
Mueller-HintonAgar
Candida selective agar acc.to NICKERSON 念珠菌選擇瓊脂 1.10456.0500 MERCK默克 incubation media Candida selective agar acc.to NICKERSON 念珠菌選擇瓊脂 1.10456.0500 MERCK默克
胰蛋白胨大豆肉湯培養基 250g 可廣泛應用于細菌的培養,特別用于消毒劑消毒效果的測試、*的非選擇性增菌培養及蠟...
胎兒骨髓間質干細胞成骨誘導分化
PCR Mix 染料10mL保存CCDABase
ATCC培養基:2693改良Dixon(mDixon) 250g 用于真菌培養
酸性肉湯 Acid Borth 250 用于酸性罐頭食品商業無菌檢驗
Vogel-Johnson瓊脂基礎250g/瓶用于*選擇性分離,每培養基中添加0805incubationmediaVogel-Johnson瓊脂基礎250g/瓶用于*選擇性分離,每培養基中添加0805
三糖鐵管 5ml*20支/包 用于腸桿菌科細菌的生化反應篩選
PCR Mix 染料10mL保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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