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更新時間:2017-07-17 13:20:53瀏覽次數:141次
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即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數的 PCR(循環(huán)數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片詳細說明書:
17-phenyl trinor Prostaglandin E2 (500 ug) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 17-phenyl trinor PGE2; 17-phenyl trinor Prostaglandin E2
10058-F4 (10 mg) 5-[(4-ethylphenyl)methylene]-2-thioxo-4-thiazolidinone
*七水合物(1KG) Sodium Phosphate, Dibasic, Heptahydrate, ACS Grade; Cas 7782-85-6; Formula: Na2HPO4
NSC 87877 (50 mg) 8-hydroxy-7-[2-(6-sulfo-2-naphthalenyl)diazenyl]-5-inoneolinesulfonic acid; NSC 87877
2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate (250 mg) 2-(2,7-dichloro-3,6-diacetyloxy-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; DCFH|DCFH-DA; 2,7-Dichlorodihydrofluorescein diacetate
POE (20) sorbitan monooleate, Polyethylene glycol sorbitan monooleate, Polyoxyethylenesorbitan monooleate, Polysorbate 80 Tween 80, MegaPure Detergent, 10% Solution
Sodium Phosphate Assay Buffer (10 ml) Sodium Phosphate Assay Buffer
AZD 2461 4-[[4-fluoro-3-[(4-methoxy-1-piperidinyl)carbonyl]phenyl]methyl]-1(2H)-Phthalazinone
cis-trismethoxy Resveratrol (500 mg) 1,3-dimethoxy-5-[(1Z)-2-(4-methoxyphenyl)ethenyl]-benzene; cis-Trimethoxy Stilbene; cis-trismethoxy Resveratrol
25N-NBOMe (hydrochloride) (1 mg) 2;C-N-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxy-4-nitnophenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
XLR11 6-hydroxyindole metabolite (5 mg) (1-(5-fluoropentyl)-6-hydroxy-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)methanone; 5-fluoro 6-hydroxyindole metabolite; XLR11 6-hydroxyindole metabolite
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 50 kDa
20-HETE-d6 (25 ug) 20-xy7noxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-16,16,17,17,18,18-d6 acid; 20-xy7noxy Arachidonic Acid-d6; 20-HETE-d6
CBL-018 (10 mg) naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
AMCA C2 馬來酰亞胺 AMCA C2 Maleimide
2-etxylami-pxenylbutane (xy7nochloride) (10 mg) N,α-dietxyl-benzeneethanamine, monoxy7nochloride; 2-etxylami-pxenylbutane (xy7nochloride)
17-Octadecynoic Acid (100 mg) 17-octadecynoic acid; Alk-16|17-ODYA; 17-Octadecynoic Acid
N- KN-93
Argininebroth
沙氏葡萄糖肉湯 酵母菌、霉菌以及其它耐酸菌培養(yǎng) 500g incubation media 沙氏葡萄糖肉湯 酵母菌、霉菌以及其它耐酸菌培養(yǎng) 500g
醋酸醋桿菌 食用 支/瓶
PH6.8磷酸鹽緩沖液500ml/瓶用于樣品稀釋處理
AntibioticAgarNo.6
PseudomonasAgarP
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) 250(g) incubation media 胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE) 250(g)
溶脲支原體快速培養(yǎng)基 UU Medium 1人份/1支 BR
炭疽桿菌沉淀血清疽桿菌檢測用配套試劑incubationmedia炭疽桿菌沉淀血清疽桿菌檢測用配套試劑
丙酸鹽(枯草芽孢桿菌) 20支 用于枯草芽孢桿菌生化試驗
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片UBAMedium
APT肉湯 APT Broth 用于異質發(fā)酵乳酸桿菌和其它需高含量鹽酸胺素菌的培養(yǎng)。
OF培養(yǎng)基 HLGB 250克 細菌的氧化發(fā)酵試驗
幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng),需添加抗生素及馬血incubationmedia幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng),需添加抗生素及馬血
THB培養(yǎng)基 250g 用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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