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即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存

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更新時間:2017-07-17 13:35:34瀏覽次數(shù):93次

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即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存詳細說明書:

即用型熒光定量 PCR 試劑盒100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15R),19R-hydroxy Prostaglandin E2 1 mg     9-oxo-11alpha。,15R19R-trihydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid 15R),19R-hydroxy PGE2 15R),19R-hydroxy Prostaglandin E2

AKB48 N-4-fluorobenzyl analog 1 mg     FUB-AKB48 N-((3s,5s,7s-adamantan-1-yl-1-4-fluorobenzyl-1H-indazole-3-carboxamide

無水流鈉(100GM     Sodium Sulfate Anhydrous 7757-82-6 MW 142.02 ACS

Protocatechuic Acid 50 g     34-dihydroxy-benzoic acid NSC 16631|PCA Protocatechuic Acid

Traumatic Acid 1 g     2E-dodecenedioic acid trans-2-Dodecenedioic Acid Traumatic Acid

3-Ethyldimethylammoniopropane-1-sulfonate     NDSB-211
COX-FIS Arachidonic Acid 1 ea     Arachidonic Acid COX-FIS Arachidonic Acid

*標(biāo)記二甲基化組蛋白H3K36多肽     Biotinylated Dimethyl Histone H3K36 Peptide 100 ul

CAY10594 1 mg     N-[2-4-oxo-1-phenyl-138-triazaspiro[45]dec-8-ylethyl]-2-nepxtxelenecarboxamide CAY10594

Desmosterol 1 mg     24-dehydro Cholesterol|NSC 226126 3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol

JWH 081 N-pentanoic acid metabolite-d5 500 ug     5-3-4-methoxy-1-naphthoyl-1H-indol-1-yl-24567-d5-pentanoic acid JWH 081 N-pentanoic acid metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 12-14 kDa
9S-HOTrE 5 mg     9S-xy7noxy-10E12Z15Z-octadecatrienoic acid 9S-HOTrE

L-Ascorbic Acid 2-phosphate megnewium salt 50 g     AA2P|Ascorbyl PM|Phospitan C 2-dixy7nogen phosphate-L-ascorbic acid, dimegnewium salt

mFluor Blue 570 琥珀酰亞胺酯     mFluor Blue 570 SE

(±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide 1 mg     (±)-N-2-fluoroetxyl-2-metxyl-5Z8Z11Z14Z-eicosatetraenamide 2-metxyl-2-fluoro AEA|2-metxyl-2-fluoro Anandamide|O-689 (±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide

45-dexy7no Docosahexaenoic Acid 25 ug     7Z10Z13Z16Z19Z-docosapentaen-4-ynoic acid 45-dexy7no DHA|45-dexy7no Cervonic Acid 45-dexy7no Docosahexaenoic Acid

2R4S-etxyl 2-etxyl-4-metxoxycarbonyl-6-trifluorometxyl-34-dixy7noinoneoline-12H-carboxylate CP-529414 CP529414 CP 529414     EZSolution Torcetrapib
TPYAgarMedium

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*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP)250g/瓶用于*的計數(shù)、分離,每培養(yǎng)基中添加和incubationmedia*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP)250g/瓶用于*的計數(shù)、分離,每培養(yǎng)基中添加和1201

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N6培養(yǎng)基(不含蔗糖和瓊脂)瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaN6培養(yǎng)基(不含蔗糖和瓊脂)瓶用于植物組織培養(yǎng)

225ml3%堿性蛋白胨水均質(zhì)袋 10/ 用于副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)

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