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Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片

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更新時間:2017-07-17 13:36:22瀏覽次數:169次

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Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片詳細說明書:

20-ethyl Prostaglandin E2 10 mg     9-oxo-11alpha。,15S-dihydroxy-20a20b-dihomoprosta-5Z13E-dien-1-oic acid 20-ethyl PGE2 20-ethyl Prostaglandin E2

AKB48 N-4-fluorobenzyl analog 5 mg     FUB-AKB48 N-((3s,5s,7s-adamantan-1-yl-1-4-fluorobenzyl-1H-indazole-3-carboxamide

流*(100GM     Streptomycin Sulfate 650 units/mg

Spermidine 10 g     N1-3-aminopropyl-14-butanediamine Spermidine

Traumatic Acid 500 mg     2E-dodecenedioic acid trans-2-Dodecenedioic Acid Traumatic Acid

3-Ethyldimethylammoniopropane-1-sulfonate     NDSB-221
COX-FIS DMSO 3 ml     Dimethylsulfoxide COX-FIS DMSO

乙酰化組蛋白H4K8多肽     Acetyl Histone H4K8 Peptide 100 ul

CAY10594 25 mg     N-[2-4-oxo-1-phenyl-138-triazaspiro[45]dec-8-ylethyl]-2-nepxtxelenecarboxamide CAY10594

Desmosterol 25 mg     24-dehydro Cholesterol|NSC 226126 3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol

RCS-4 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5 500 ug     1-4-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl-24567-d5-4-methoxyphenyl-methanone RCS-4 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 12-14 kDa
13S-HOTrE(γ) 100 ug     13S-xy7noxy-6Z9Z11E-octadecatrienoic acid 13S-HOTrE(γ)

Picaridin 10 mg     Bayrepel|Icaridin|KBR 3023|Saltidin

mFluor Yellow 630 琥珀酰亞胺酯     mFluor Yellow 630 SE

(±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide 5 mg     (±)-N-2-fluoroetxyl-2-metxyl-5Z8Z11Z14Z-eicosatetraenamide 2-metxyl-2-fluoro AEA|2-metxyl-2-fluoro Anandamide|O-689 (±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide

45-dexy7no Docosahexaenoic Acid 100 ug     7Z10Z13Z16Z19Z-docosapentaen-4-ynoic acid 45-dexy7no DHA|45-dexy7no Cervonic Acid 45-dexy7no Docosahexaenoic Acid

2-     JAK Inhibitor Pyridone 6
vitaminK1

嗜鹽性試驗用胰胨水 Halophilic experimental medium 用于弧菌的嗜鹽試驗

蛋白胨E Gelatin Peptone 250 BR

無機鹽淀粉瓊脂ISPMedium4(InorganicSalts-StarchAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養鑒定incubationmedia無機鹽淀粉瓊脂ISPMedium4(InorganicSalts-StarchAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養鑒定

E.coliChromogenicMedium
KF鏈球菌瓊脂用于鏈球菌的選擇性分離及計數

乳糖膽鹽培養基 Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標準)

亮綠瓊脂 Brilltant Green Agar 250 沙門氏菌分離培養

兔血漿0.5ml*20用于*凝固酶試驗incubationmedia兔血漿0.5ml*20用于*凝固酶試驗

葡萄糖銨培養基 250g 用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(GB標準)
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片DeoxycholateHydrogenSulfideLactoseAgar

AKAgar(No.2)

水平板計數瓊脂培養基 Water Plate Count Agar 250 用于飼料中細菌總數測定

B5培養基含蔗糖(20g/L)和瓊脂incubationmediaB5培養基含蔗糖(20g/L)和瓊脂

3%NaClAlkalinePeptoneWater

Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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