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Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片

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Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒有必要。
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片詳細(xì)說(shuō)明書:

20-ethyl Prostaglandin E2 10 mg     9-oxo-11alpha。,15S-dihydroxy-20a,20b-dihomoprosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 20-ethyl PGE2; 20-ethyl Prostaglandin E2

AKB48 N-4-fluorobenzyl analog 5 mg     FUB-AKB48; N-((3s,5s,7s-adamantan-1-yl-1-4-fluorobenzyl-1H-indazole-3-carboxamide

流*(100GM     Streptomycin Sulfate, 650 units/mg

Spermidine 10 g     N1-3-aminopropyl-14-butanediamine; Spermidine

Traumatic Acid 500 mg     2E-dodecenedioic acid; trans-2-Dodecenedioic Acid; Traumatic Acid

3-Ethyldimethylammoniopropane-1-sulfonate     NDSB-221
COX-FIS DMSO 3 ml     Dimethylsulfoxide COX-FIS DMSO

乙?;M蛋白H4K8多肽     Acetyl Histone H4K8 Peptide 100 ul

CAY10594 25 mg     N-[2-4-oxo-1-phenyl-13,8-triazaspiro[4,5]dec-8-ylethyl]-2-nepxtxelenecarboxamide CAY10594

Desmosterol 25 mg     24-dehydro Cholesterol|NSC 226126; 3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol

RCS-4 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5 500 ug     1-4-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl-2,4,5,6,7-d5-4-methoxyphenyl-methanone; RCS-4 N-4-hydroxypentyl metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 12-14 kDa     DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 12-14 kDa
13S-HOTrE(γ) 100 ug     13S-xy7noxy-6Z9Z,11E-octadecatrienoic acid; 13S-HOTrE(γ)

Picaridin 10 mg     Bayrepel|Icaridin|KBR 3023|Saltidin

mFluor Yellow 630 琥珀酰亞胺酯     mFluor Yellow 630 SE

(±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide 5 mg     (±)-N-2-fluoroetxyl-2-metxyl-5Z8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide; 2-metxyl-2-fluoro AEA|2-metxyl-2-fluoro Anandamide|O-689; (±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide

45-dexy7no Docosahexaenoic Acid 100 ug     7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaen-4-ynoic acid; 4,5-dexy7no DHA|45-dexy7no Cervonic Acid; 4,5-dexy7no Docosahexaenoic Acid

2-     JAK Inhibitor, Pyridone 6
vitaminK1

嗜鹽性試驗(yàn)用胰胨水 Halophilic experimental medium 用于弧菌的嗜鹽試驗(yàn)

蛋白胨E Gelatin Peptone 250 BR

無(wú)機(jī)鹽淀粉瓊脂ISPMedium4(InorganicSalts-StarchAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定incubationmedia無(wú)機(jī)鹽淀粉瓊脂ISPMedium4(InorganicSalts-StarchAgar)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定

E.coliChromogenicMedium
KF鏈球菌瓊脂用于鏈球菌的選擇性分離及計(jì)數(shù)

乳糖膽鹽培養(yǎng)基 Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))

亮綠瓊脂 Brilltant Green Agar 250 沙門氏菌分離培養(yǎng)

兔血漿0.5ml*20用于*凝固酶試驗(yàn)incubationmedia兔血漿0.5ml*20用于*凝固酶試驗(yàn)

葡萄糖銨培養(yǎng)基 250g 用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片DeoxycholateHydrogenSulfideLactoseAgar

AKAgar(No.2)

水平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 Water Plate Count Agar 250 用于飼料中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定

B5培養(yǎng)基含蔗糖(20g/L)和瓊脂incubationmediaB5培養(yǎng)基含蔗糖(20g/L)和瓊脂

3%NaClAlkalinePeptoneWater

Real-Time PCR 稀釋液1mL圖片變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合

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