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ROX 參考染料200μL運輸

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更新時間:2017-07-17 13:36:44瀏覽次數(shù):187次

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ROX 參考染料200μL運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

ROX 參考染料200μL運輸詳細說明書:

ROX 參考染料200μL運輸產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
ROX 參考染料200μL運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
ROX 參考染料200μL運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
ROX 參考染料200μL運輸使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
20-ethyl Prostaglandin E2 5 mg     9-oxo-11alpha。,15S-dihydroxy-20a20b-dihomoprosta-5Z13E-dien-1-oic acid 20-ethyl PGE2 20-ethyl Prostaglandin E2

Delorazepam 1 mg     Chlordesmethyl7iezepem|NSC 169895|Ro 5-3027 7-chloro-5-2-chlorophenyl-1,3-dihydro-2H-1,4-benzodiazepin-2-one

流*(25GM     Streptomycin Sulfate 650 units/mg

Spermidine 25 g     N1-3-aminopropyl-14-butanediamine Spermidine

Traumatic Acid 5 g     2E-dodecenedioic acid trans-2-Dodecenedioic Acid Traumatic Acid

3-Ethyldimethylammoniopropane-1-sulfonate     NDSB-221
COX-FA COX Positive Control 1 ea     COX Positive Control COX-FA COX Positive Control

*標(biāo)記乙酰化組蛋白H3K14多肽     Biotinylated Acetyl Histone H3K14 Peptide 200 ul

CAY10594 5 mg     N-[2-4-oxo-1-phenyl-138-triazaspiro[45]dec-8-ylethyl]-2-nepxtxelenecarboxamide CAY10594

Desmosterol 5 mg     24-dehydro Cholesterol|NSC 226126 3β)-cholesta-5,24-dien-3-ol

RCS-4 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5 1 mg     1-5-hydroxypentyl-1H-indol-3-yl-24567-d5)(4-methoxyphenylmethanone RCS-4 N-5-hydroxypentyl metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 25 kDa     DiaEasy Dialyzer (250 ul) MWCO 25 kDa
13S-HOTrE(γ) 500 ug     13S-xy7noxy-6Z9Z11E-octadecatrienoic acid 13S-HOTrE(γ)

Picaridin 5 mg     Bayrepel|Icaridin|KBR 3023|Saltidin

mFluor Red 700 琥珀酰亞胺酯     mFluor Red 700 SE

(±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide 50 mg     (±)-N-2-fluoroetxyl-2-metxyl-5Z8Z11Z14Z-eicosatetraenamide 2-metxyl-2-fluoro AEA|2-metxyl-2-fluoro Anandamide|O-689 (±)-2-metxyl Arachidonoyl-2-Fluoroetxylamide

45-dexy7no Docosahexaenoic Acid 500 ug     7Z10Z13Z16Z19Z-docosapentaen-4-ynoic acid 45-dexy7no DHA|45-dexy7no Cervonic Acid 45-dexy7no Docosahexaenoic Acid

5-((7-Cl-1H-indol-3-ylmetxyl-3-metxylimidazolidine-24-dione); 7-Cl-O-Nec-1     EZSolution Nec-1s
Brain-HeartBaptistextractionliquidmedium

雙料乳糖膽鹽(含中和劑)培養(yǎng)基 Double Lactose Bile Medium 用于化妝品中糞大腸菌群的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))

SE增菌液 Selenite Enrichment Medium 250 增殖標(biāo)本中的沙門氏菌

亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中incubationmedia亞碲酸鹽卵黃增菌液5ml*Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中

WSSalmonellaAgar
緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養(yǎng)基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基)2250g用于MRVP試驗

5301-prf SteCM-prf 星形細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 5301-prf SteCM-prf 星形細胞培養(yǎng)基 500 ml

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 300ml/*10 用于藥品抑菌劑效力檢測中真菌檢測

兔血漿0.5ml**凝固酶試驗

TMAOMedium
ROX 參考染料200μL運輸沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)250g用于沙門氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

AHM鑒別用培養(yǎng)基 250(g) incubation media AHM鑒別用培養(yǎng)基 250(g)

改良酵母浸汁-孟加拉紅肉湯 Modified Yeast Extract-Rose Bengal Broth 250 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養(yǎng)

指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)250用于炭疽桿菌的分離鑒別incubationmedia指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)250用于炭疽桿菌的分離鑒別

多粘菌素B(1000IU*5) 3.3mg/*

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