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AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸

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更新時間:2017-07-17 13:39:39瀏覽次數:161次

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AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸詳細說明書:

20-hydroxy Prostaglandin E2 1 mg     9-oxo-11α,15S20-trihydroxy-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid 20-hydroxy PGE2 20-hydroxy Prostaglandin E2

AdipoRon 50 mg     2-4-benzoylphenoxy-N-[1-phenylmethyl-4-piperidinyl]-acetamide

蔗糖(2.5KG     Sucrose 57-50-1

XTT sodium salt 250 mg     23-bis2-methoxy-4-nitno-5-sulfophenyl-5-[phenylaminocarbonyl]-inner salt-2H-tetrazolium monosodium salt XTT sodium salt

n-Triacontanol 500 mg     1-triacontanol Miraculan|Well-Bloom n-Triacontanol

Caspase家族抑制劑套裝II     Caspase Family Inhibitor Set II
LSD1 human recombinant Assay Reagent 1 ea     LSD1 human recombinant|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay human recombinant); LSD1 human recombinant Assay Reagent

乙酰化組蛋白H4K5多肽     Acetyl Histone H4K5 Peptide 200 ul

Mirin 50 mg     2-amino-5-[4-hydroxyphenylmethylene]-45H-thiazolone Mirin

MTEP hydrochloride 1 mg     3-[2-2-methyl-4-thiazolylethynyl]-pyridine, monohydrochloride

RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5 100 ug     5-3-4-methoxybenzoyl-1H-indol-1-yl-24567-d5-pentanoic acid RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5

Geldanamycin     Geldanamycin
13S-HOTrE 1 mg     13S-xy7noxy-9Z11E15Z-octadecatrienoic acid 13S-HOTrE

Biotin-HPDP 50 mg     3aS,4S,6aR-hexaxy7no-2-oxo-N-[6-[[1-oxo-3-2-pyridinyldithiopropyl]amino]hexyl]-1H-thieno[3,4-d]imidazole-4-pent*

APC-iFluor 750 串聯化合物     APC-iFluor 750 Tandem

α-Linolenoyl Ethanolamide 100 mg     N-2-xy7noxyetxyl-9Z12Z15Z-octadecatrienamide α-Linolenoyl Ethanolamide

45-EpDPE metxyl ester 500 ug     45-epoxy-7Z10Z13Z16Z19Z-docosapentaenoic acid metxyl ester 45-epoxy Docosapentaenoic Acid metxyl ester|45-EDP metxyl ester 45-EpDPE metxyl ester

3-2-Chloropxenyl-N-4-chloropxenyl-N5-dimetxylisoxazole-4-carboxamide     EZSolution TGR5 Receptor Agonist
D/E中和瓊脂250g用于衛生環境中微生物的分離培養

水稻赤霉菌培養基 250g 用于水稻中赤霉菌培養

改良V-P培養基 V-P Medium,Modified 250 用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(SN標準)

標準Ⅱ號營養瓊脂250g/瓶用于培養非苛氧的細菌,也用于奶制品中細菌總數的測定incubationmedia標準Ⅱ號營養瓊脂250g/瓶用于培養非苛氧的細菌,也用于奶制品中細菌總數的測定

伊紅美藍瓊脂平板(9cm) 10/ 弱選擇性培養基、用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
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LB agar acc.to MILLER LB瓊脂 1.10283.0500 MERCK默克 incubation media LB agar acc.to MILLER LB瓊脂 1.10283.0500 MERCK默克

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AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸動力-吲哚-尿素培養基基礎(MIU)250g用于細菌的復合生化試驗

AHMMedium

蔗糖瓊脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 250 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(GB標準)

5000ml/incubationmedia5000ml/

BoltonBroth

AMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次運輸變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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